[发明专利]一种猪牛羊肉快速检测试剂盒及制备方法

权利要求书

1.一种猪牛羊肉快速检测试剂盒，该试剂盒采用免疫层析法，用来快速鉴别猪牛羊肉的种类，其特征在于：该试剂盒包括试纸底板（1）；所述试纸底板（1）上依次粘贴有样品垫（2）、胶体金垫（3）、硝酸纤维素膜（4）以及吸水垫（5）；

所述胶体金垫（3）附着胶体标记的猪、牛、羊各自的特异性单克隆抗体1；

所述的硝酸纤维素膜上包被有猪、牛、羊各自的特异性单克隆抗体2的检测线（6）以及质控线（7）。

2.根据权利要求1所述的猪牛羊肉快速检测试剂盒，其特征在于：所述的猪、牛、羊各自的特异性单克隆抗体具体为分离纯化出猪、牛、羊肉各自的、区别于其他二种肉的特异性蛋白，再制备的单克隆抗体。

3.根据权利要求1所述的猪牛羊肉快速检测试剂盒，其特征在于：所述胶体标记的猪、牛、羊各自的特异性单克隆抗体1具体为胶体金分别标记猪、牛、羊各自的特异性单克隆抗体1，再制备成一个胶体金垫。

4.根据权利要求1所述的猪牛羊肉快速检测试剂盒，其特征在于：所述检测线（6）为在同一硝酸纤维素膜上，依次分别划膜有猪、牛、羊的单克隆抗体2。

5.如权利要求1所述的猪牛羊肉快速检测试剂盒的制备方法，其特征在于：该制备方法的步骤为：

1）取胶体金溶液，以碳酸钾溶液调节pH值为7.6；

2）加入猪、牛、羊单克隆抗体1，搅拌，静置；

3）搅拌的同时滴加BSA；

4）将上述步骤制得的金标抗体低温离心，去除大颗粒，去除上清液中的未标记蛋白，用稀释液复溶；

5）用喷金仪将制备好的金标单克隆抗体喷在同一聚酯膜上，干燥即得胶体金金垫，备用；

6）用划膜仪猪、牛、羊单克隆抗体2依次划在硝酸纤维素膜上，形成三条检测线；将兔抗鼠 IgG划在硝酸纤维素膜上，形成质控线，干燥；

7）将胶体金金垫、样品垫、硝酸纤维素膜、吸水垫依次粘附于PVC背衬上；将硝酸纤维素膜划检测线的一端与胶体金金垫连接，胶体金金垫另一端与样品垫连接，硝酸纤维素膜划质控线的一端与吸水纸连接，粘贴完成后分切成试纸条；将试纸条压上塑料卡壳，装入带干燥剂的密封塑料袋中，制备完毕。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：以100ml胶体金溶液计，加入0.5mg的猪、牛、羊单克隆抗体1；滴加2 mL 的 5% BSA，所述稀释液为原体积 1/10的稀释液。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述步骤5）中每个4x5mm胶体金金垫金标单克隆抗体喷量为400 ng。

8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述步骤6）中，将 1 mg·mL -1 的猪、牛、羊单克隆抗体2以 1 μL·cm -1 的量依次划在硝酸纤维素膜的检测线处；将 1 mg·mL -1 的兔抗鼠 IgG 以 1 μL·cm -1 的量划在硝酸纤维素膜的质控线处。