[发明专利]一种从南极磷虾中提取高纯度海洋磷脂的方法

说明书

本发明提供一种从南极磷虾中提取高纯度海洋磷脂的方法，其步骤包括：将南极磷虾匀浆，复合酶酶解；固液分离，固体部分加入碱性乙醇液超声辅助提取；水沉除油后，进行聚苯乙烯凝胶柱层析；冰乙醇液洗涤，得到高纯度磷脂。本发明原料采用菠萝蛋白酶和几丁质酶复合酶酶解，用碱性乙醇液进行高效提取，提高了磷脂的提取效率，全程温度不超过50℃，不损失磷脂的生理活性，提取的磷脂纯度高于95％，较现有方法有显著提高。

技术领域

本发明涉及一种从南极磷虾中提取海洋磷脂的方法，属于海洋活性物质技术领域。

背景技术

南极磷虾是一种生活在南大洋的甲壳类浮游动物，是地球上最大的单种生物资源之一，其现存量高达6.5～10.0亿吨，成熟虾年产量为3～5亿吨，年可捕获量可达1.3亿吨，使其成为巨大的潜在渔业资源。我国目前已经将南极磷虾列为今后远洋渔业发展的主要开发品种之一。南极磷虾中磷脂的含量丰富，其磷脂的脂肪酸组成以EPA和DHA为主，含量占磷脂中脂肪酸总量的40％以上。因此，南极磷虾中高纯度磷脂的制备必然是深加工南极磷虾中最关键的技术之一。

磷脂是一类含磷酸根的类脂化合物，是组织细胞的基本组成成分，包括鞘磷脂和甘油磷脂两大类。前者主要见于高等动物的红细胞膜中，后者在动物肝脏、脑及卵巢中含量丰富。磷脂不仅具有较高的营养价值，还具有生理调节机能，促进人体新陈代谢、增强免疫力、预防疾病等作用。现在，美国、欧洲、日本等发达国家已将磷脂应用于临床中，预防脑、心、肝、肿瘤等疾病。此外，磷脂还具有乳化、润湿、抗氧化、改善物料粘度、防止淀粉老化等特征，使其在食品工业、轻工、化工等领域有着广泛的应用。

目前，市场上磷脂产品主要是大豆磷脂和蛋黄磷脂。大豆磷脂虽然存在广泛，价格低廉，但其脂肪酸组成相对简单，不饱和程度较低；蛋黄磷脂的磷脂酰胆碱纯度较高，但生产成本高，缺少对人体有益的多不饱和脂肪酸。海产动物来源的磷脂因其侧链中富含二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)等丰富的ω-3多不饱和脂肪酸，具有显著的降血脂、抗衰老、促进神经传导、提高大脑活力、预防心脑血管疾病，保肝、增强免疫力、抑制肿瘤细胞生长等多种功能，开发利用前景广阔。

国内外对磷脂的提取纯化进行了很多的研究，常用的方法有：溶剂提取法、吸附色谱法、超临界萃取法、酶解法、无机盐复合沉淀法、微波提取法、膜分离法等。但是，这些方法存在很多的技术缺陷：原料方面主要从大豆和蛋黄中提取，从而和人类抢夺食物资源；超临界萃取法、膜分离法等工艺较为复杂，操作成本高；无机盐沉淀法引入金属离子(Zn²⁺、Cd²⁺等)，具有一定的毒性，影响磷脂的质量等等。

目前，针对南极磷虾中提取的磷脂多以磷虾油的产品形式存在，提取方法大多为酶解法和溶剂提取法，其得到的磷脂含量较低，最高仅达50～60％。专利CN102603790A利用90～100％乙醇提取后，正己烷萃取、丙酮沉淀的方式得到高纯度磷脂酰胆碱。专利CN103509047A将南极磷虾头进行煎煮和无水乙醇提取后，经膜分离、硅胶或大孔树脂柱层析获得磷脂酰胆碱产品。但是，以上均是针对磷脂类的单一成分，并非是存在于南极磷虾中的种类丰富的磷脂组合。专利CN102559368A将新鲜南极磷虾低温自溶后进行酶解，再用乙醇进行提取得到初步的磷脂产品。专利CN104531332A利用乙酸乙酯和正丁醇组成的混合溶剂提取南极磷虾中的总磷脂，其磷脂含量为27～45％之间。因此，进一步开发研究从南极磷虾中提取高纯度磷脂的方法，对于扩大海洋磷脂的生产来源和提升南极磷虾的利用价值具有重要意义。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种操作简便，安全环保的从南极磷虾中提取高纯度海洋磷脂的方法。

为了实现上述发明目的，本发明提供的技术方案是，一种从南极磷虾中提取高纯度海洋磷脂的方法，步骤如下：

1)将南极磷虾加入0.5～2倍量水，匀浆，调节pH至6.5，40～45℃条件下加入复合酶水解2～4小时；