[发明专利]一种人神经生长因子类似物及其制备方法有效
申请号: | 201611160674.3 | 申请日: | 2016-12-15 |
公开(公告)号: | CN106749605B | 公开(公告)日: | 2019-12-24 |
发明(设计)人: | 汤华东;万滔;刘娜;梅芸;李玉薇;陈亚 | 申请(专利权)人: | 武汉海特生物制药股份有限公司 |
主分类号: | C07K14/48 | 分类号: | C07K14/48;C12N15/12;C12N15/70 |
代理公司: | 11228 北京汇泽知识产权代理有限公司 | 代理人: | 程殿军;张瑾 |
地址: | 430056 湖北省武汉市经*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 人神经生长因子 类似物 重组人神经生长因子 大肠杆菌表达系统 正常氨基酸序列 大肠杆菌 甘氨酸残基 表达体系 融合蛋白 表达量 高活性 可溶 制备 | ||
1.一种人神经生长因子类似物,其特征在于,所述人神经生长因子类似物的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种如权利要求1所述的人神经生长因子类似物的制备方法,其特征在于,将改造的人神经生长因子原体cDNA插入原核表达载体,构建成重组表达载体,采用大肠杆菌表达系统表达制备;大肠杆菌表达系统表达制备的表达产物经纯化后,采用凝血酶酶切,再次纯化获得人神经生长因子类似物纯品;其中,所述改造的人神经生长因子原体cDNA编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.3中第8~231位所示序列。
3.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述原核表达载体为融合蛋白表达载体,为pMAL载体、pGEX载体或pET载体。
4.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述pMAL载体为pMAL-p5x、pMAL-p5E、pMAL-p5G,所述pET载体为pET39b或pET32a。
5.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述的融合蛋白表达载体经过了改造,其消除了载体自身的凝血酶酶切识别位点。
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