[发明专利]B30位苏氨酸缺失人胰岛素晶体的制备方法

权利要求书

1.一种B30位苏氨酸缺失人胰岛素晶体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将B30位苏氨酸缺失人胰岛素溶解，加入有机溶剂、锌离子、柠檬酸三钠和无机盐，得到结晶液；所述结晶液中柠檬酸三钠的浓度为0.025-0.05 M；所述结晶液中锌离子与B30位苏氨酸缺失人胰岛素的摩尔比为10-15：1；（2）调节结晶液的pH值，进行结晶，即得；

步骤（1）所述结晶液中有机溶剂的体积百分比为10-15%；所述有机溶剂选自丙酮、乙腈或2-甲基-2,4-戊二醇中的任意一种；

步骤（1）所述结晶液中无机盐的浓度为0.01-0.05 M；所述无机盐选自氯化钠、硫酸铵或醋酸铵中的任意一种或两种；

步骤（1）所述结晶液中B30位苏氨酸缺失人胰岛素的浓度为3-9 g/L；

步骤（2）所述调节结晶液的pH值包括：先调节结晶液的pH值为7.8-8.0，然后加入有机酸调节pH值为5.8-6.0；

步骤（2）所述结晶的方式为室温静置40-50 min，搅拌3-4 h，然后4℃静置8-9 h，得到结晶。

2.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述结晶液中锌离子与B30位苏氨酸缺失人胰岛素的摩尔比为10-12：1；

所述锌离子选自氯化锌、醋酸锌或碘化锌中的任意一种。

3.按照权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述结晶液中锌离子与B30位苏氨酸缺失人胰岛素的摩尔比为10-11：1。

4.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述结晶液中无机盐的浓度为0.01-0.03 M。

5.按照权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述结晶液中无机盐的浓度为0.01-0.02 M。

6.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述溶解是用稀酸溶解B30位苏氨酸缺失人胰岛素；其中，所述稀酸的浓度为10-40 mM；所述稀酸选自盐酸、柠檬酸或醋酸中的任意一种。

7.按照权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述稀酸的浓度为15-30 mM。

8.按照权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述稀酸的浓度为20-25 mM。

9.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述有机酸为柠檬酸。