[发明专利]颐和春制剂中人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量测定方法

权利要求书

1.颐和春制剂中人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量测定方法，其特征在于：以人参皂苷Rg1、Re、Rb1对照品为对照，以乙腈为流动相A、水为流动相B，采用梯度和等度洗脱相结合的高效液相色谱法测定颐和春制剂中人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量。

2.根据权利要求1所述的颐和春制剂中人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量测定方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)对照品制备：精密称取人参皂苷Rg₁对照品、人参皂苷Re对照品及人参皂苷Rb₁对照品，加甲醇溶解制成每1ml含Rg1、Re、Rb1分别为0.05mg、0.25mg、0.60mg的混合溶液，摇匀，即得；

(2)供试品溶液制备：取颐和春制剂，精密称定并置于锥形瓶中，加入醇类溶剂超声、离心，取上清液，残渣加入醇类溶剂超声、离心，合并上清液；将上清液减压浓缩；残渣加水溶解，乙醚萃取；弃去乙醚层，水层中加入水饱和的正丁醇萃取；正丁醇层依次用氢氧化钠水溶液和正丁醇饱和的水洗涤，正丁醇层蒸干，残渣加甲醇溶解并定容，摇匀，即得；

(3)人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量测定：分别精密吸取供试品溶液与对照品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，测定；色谱条件为：

填充剂：十八烷基硅烷健合硅胶；

色谱柱：Waters Symmetry C18 250mm×4.6mm，5um；

乙腈为流动相A，水为流动相B；

检测波长为203nm，柱温30℃，流速1.0ml/min；

理论塔板数在6000以上，以人参皂苷Rg1计；

洗脱程序：

时间(min)	流动相A(乙腈)	流动相B(水)
0-35	20％	80％
35-55	20％—29％	80％—71％
55-70	29％	71％
70-100	29％—40％	71％—60％
100-110	40％—19％	60％—81％
110	19％	81％ 。