[发明专利]黄野螟酪氨酸羟化酶全长序列及其克隆方法在审
申请号: | 201611181604.6 | 申请日: | 2016-12-12 |
公开(公告)号: | CN107287219A | 公开(公告)日: | 2017-10-24 |
发明(设计)人: | 程杰;林同;陈敬祥;蔡紫玲;刘琪司 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | C12N15/53 | 分类号: | C12N15/53;C12N9/02;C12N15/10 |
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地址: | 510642 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 黄野螟 酪氨酸 羟化酶 全长 序列 及其 克隆 方法 | ||
1.一个黄野螟酪氨酸羟化酶基因全长序列,其特征在于此序列是由2220个碱基对组成,其全序列为:
序列中划线标示的atg与tga分别为此编码序列的初始密码子与终止密码子,所得到的黄野螟酪氨酸羟化酶基因的ORF序列全长为1677bp。
2.根据权利要求1所述的黄野螟酪氨酸羟化酶基因的ORF全序列,其编码的蛋白质为黄野螟酪氨酸羟化酶,其特征在于,黄野螟酪氨酸羟化酶由558个氨基酸组成,其氨基酸序列为:
3.如权利要求1所述黄野螟酪氨酸羟化酶基因全长序列的克隆方法,其特征在于其操作步骤如下:
(1)黄野螟成虫总RNA的提取;
(2)cDNA第一条链的合成;
(3)3′RACE技术扩增3′端序列;
(4)所得序列与建立的黄野螟cDNA文库中酪氨酸羟化酶基因5′端序列进行无重复拼接,获得其全序列。
4.如权利要求3所述黄野螟酪氨酸羟化酶基因全长序列的克隆方法,其特征在于设计了一对特异性引物:
HV-TH-3′-Outer:TGCGTGACGGTATGGGAT
HV-TH-3′-Inner:ACGCCAACTCTCCATTCC。
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