[发明专利]克林霉素磷酸酯凝胶中有关物质的检测方法

权利要求书

1.一种克林霉素磷酸酯凝胶中有关物质的检测方法，其特征在于包括如下步骤：

a制备供试品溶液：将克林霉素磷酸酯凝胶用体积比为80:20的磷酸缓冲液-90%乙腈甲醇溶液溶解并制成每1ml中含克林霉素磷酸酯2～4mg的溶液，摇匀，滴入3～5滴饱和的雷氏铵盐水溶液，振摇、取上清液滤过，取续滤液作为供试品溶液；

b制备对照溶液：精密量取上述供试品溶液适量，用体积比为80:20的磷酸缓冲液-90%乙腈甲醇溶液溶解并制成每1ml中含克林霉素磷酸酯70～110μg的溶液，作为对照溶液；

c 制备对照品溶液：分别精密称取克林霉素对照品和林可霉素对照品各适量，加上述b）过程制得的对照溶液溶解并定量稀释制成每1ml中含克林霉素20～40μg与林可霉素4～8μg的混合溶液，作为对照品溶液；

采用高效液相色谱法对上述供试品溶液、对照溶液和对照品溶液进行检测，其中高效液相色谱条件为：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱，

流动相A：体积比为92：8的磷酸缓冲液-90%乙腈甲醇溶液，

流动相B：体积比为52：48的磷酸缓冲液-90%乙腈甲醇溶液，

检测波长：210nm，

柱温：40℃，

流速为每分钟1.2ml，以线性梯度洗脱方式洗脱。

2.按照权利要求1所述的克林霉素磷酸酯凝胶中有关物质的检测方法，其特征在于所述磷酸缓冲液pH为3.9±0.05。

3.按照权利要求1或2所述的克林霉素磷酸酯凝胶中有关物质的检测方法，其特征在于所述磷酸缓冲液是采用磷酸3.5ml，加水1000ml和浓氨溶液2.5ml制成。

4.按照权利要求1所述的克林霉素磷酸酯凝胶中有关物质的检测方法，其特征在于所述线性梯度洗脱方式为，0分钟时，按照流动相A：流动相B=95:5的比例洗脱，40分钟时，按照流动相A：流动相B=5:95的比例洗脱，41分钟时，按照流动相A：流动相B=95:5的比例洗脱，46分钟时，按照流动相A：流动相B=95:5的比例洗脱。