[发明专利]一种小叶榕干浸膏指纹图谱质量控制方法

说明书

本发明公开了一种小叶榕干浸膏指纹图谱质量控制方法，所述指纹图谱为建立的小叶榕干浸膏LC‑MS指纹图谱，用对照品鉴定出大部分共有峰，尤其是一些含量较高黄酮类成分，具体包括色谱条件选择、质谱条件的选择，供试品溶液制备、对照品溶液制备、标准指纹图谱建立、鉴别及检测等步骤。该指纹图谱为深入研究小叶榕干浸膏的药效作用机制及质量控制提供了参考。

技术领域

本发明涉及质量控制领域，具体涉及一种小叶榕干浸膏指纹图谱质量控制方法。

背景技术

小叶榕是桑科植物细叶榕Ficus microcarpa L.f.的干燥叶，主要产于广东和广西。小叶榕干浸膏系细叶榕干燥叶的提取物，为咳特灵的主成分收载在2015版中国药典一部的质量标准中，用于治疗咳喘和慢性支气管炎。目前的Chp2015版药典标准，对小叶榕干浸膏采用HPLC测定牡荆素和异牡荆素的含量，未对小叶榕干浸膏中黄酮类等主要成分进行分析。

中药指纹图谱具有整体性、宏观性和模糊性，能够综合、全面地反映出中药产品的内在质量，可有效地对中药及其制剂进行整体质量控制。中药及其制剂以指纹图谱作为质量控制方法，广泛应用在中药质量控制的各研究领域

液质联用(LC-MS)技术已广泛应用于中药化学成分分析、中药代谢研究、中药质量控制及中药药代动力学研究中。采用液质联用技术建立中药材及其制剂的高效液相色谱图并对其特征峰进行指认，对于中药材及其制剂的全面质量控制具有指导意义。

目前已有小叶榕的HPLC指纹图谱研究报道，可从图谱的形状来反映药材的归属，但HPLC指纹图中仍有较多的成分是未知的，给小叶榕质量评价及其制剂质量控制带来困难。

《小叶榕干浸膏及咳特灵胶囊的HPLC指纹图谱研究及LC-Q-TOF-MS成分分析》(中国实验方剂学杂志第22卷第3期 2016年2月)建立了小叶榕干浸膏及咳特灵胶囊的HPLC指纹图谱，确定了14个共有峰，经液质鉴别出表儿茶素、对香豆酸、阿福豆素、牡荆素-7-葡萄糖苷、荭草苷、异荭草苷、牡荆苷、牡荆素葡萄糖苷、异牡荆素吡喃葡萄糖苷、异牡荆苷峰。

为了弄清小叶榕HPLC图谱各色谱峰的成分，研究小叶榕的有效成分组成，本发明建立了小叶榕干浸膏的LC-MS指纹图谱，确定了18个共有峰，将异牡荆素峰设为参照峰，并经对照品对照定性和HPLC/MS鉴定，确认没食子酸、原儿茶酸、5-二咖啡酰奎宁酸、儿茶素、咖啡酸、绿原酸、表儿茶酸、荭草素、牡荆素、异荭草素和芦丁峰。图谱重复性，精密度良好，专属性强，为进一步研究和制订小叶榕叶及其提取物的质量控制提供科学依据，为深入研究小叶榕的药效物质基础提供实验参考。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种小叶榕干浸膏指纹图谱质量控制方法。所述指纹图谱为建立的小叶榕干浸膏LC-MS指纹图谱，用对照品鉴定出大部分共有峰，尤其是一些含量较高黄酮类成分，具体包括色谱条件选择、质谱条件的选择，供试品溶液制备、对照品溶液制备、标准指纹图谱建立、鉴别及检测等步骤。该方法为进一步研究和制订小叶榕叶及其提取物的质量控制提供科学依据，为深入研究小叶榕的药效物质基础提供实验参考。

本发明是这样构成的：

一种小叶榕干浸膏指纹图谱质量控制方法，包括高效液相色谱仪进行梯度洗脱，然后通过质谱进行测定；所述的高效液相色谱条件为：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料；

检测波长：280nm；

流动相：流动相A为0.1％甲酸溶液，流动相B为甲醇，采用梯度洗脱，流动相比例均为体积百分比体积，洗脱程序如下：

0-6min，流动相A为95％→90％，流动相B为5％→10％；

6-10min，流动相A为90％→86％，流动相B为10％→14％；