[发明专利]一种低盐泡菜微生态添加剂及其制备方法有效
| 申请号： | 201611189656.8 | 申请日： | 2016-12-21 |
| 公开（公告）号： | CN106754506B | 公开（公告）日： | 2020-12-29 |
| 发明（设计）人： | 唐垚;陈功;张其圣;李恒;汪冬冬;伍亚龙 | 申请（专利权）人： | 四川东坡中国泡菜产业技术研究院 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12P21/00;A23L19/20;C12R1/225 |
| 代理公司： | 成都九鼎天元知识产权代理有限公司 51214 | 代理人： | 吕玲 |
| 地址： | 620039 四川省眉*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 低盐 泡菜 生态 添加剂 及其 制备 方法 | ||
1.一种低盐泡菜微生态添加剂，其特征在于该添加剂为戊糖乳杆菌（
2.如权利要求1所述低盐泡菜微生态添加剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
（1）将戊糖乳杆菌PCYSWX-5接入灭菌后的液体培养基中，于30～40℃培养24～48 小时，得到种子液；
（2）将步骤（1）得到的种子液按接种量1％～15％接种到发酵培养基中进行发酵培养，培养条件：30～37℃，通气量0.5～2.5vvm，转速150～300rpm，发酵30～ 48小时；
（3）将步骤（2）发酵得到的发酵液通过12000转/分钟离心15 分钟后取上清液，在上清液中慢慢加入无水硫酸铵，缓慢搅动使其完全溶解，直至硫酸铵饱和度达80％，置于4℃静置过夜，然后将其在4℃，13000 转/分钟的条件下冷冻离心20～30分钟，得到细菌素沉淀粗提物；
（4）将步骤（3）细菌素粗提物进一步采用Sephadex G-25凝胶过滤层析进行纯化，凝胶柱用10mM 硫酸钠缓冲液进行预平衡，然后将硫酸铵沉淀的样品溶解于0.10M 的磷酸盐缓冲液PBS后上柱，上柱体积为15ml，固定流速0.5ml/min，分段收集，每段2ml，通过抑菌实验检测每段收集液活性，有活性的收集液通过疏水层析进行脱盐，最后通过反相高效液相层析进行进一步纯化，从而得到纯品添加剂；所述液体培养基的配制如下：蛋白胨9～11g，牛肉膏9～11g，酵母浸粉4～6g，葡萄糖18～23g，柠檬酸胺1～3g，乙酸钠3～6g，磷酸氢二钾1～3g，吐温80 0～1.1mL，硫酸镁0.1～0.2g，硫酸锰0.03～0.06，水1000mL；所述发酵培养基包括碳氮质量比为1∶2～20的发酵底物，发酵底物按照与水的质量比为3 ～20∶100 配制成发酵培养基。
3.根据权利要求2所述低盐泡菜微生态添加剂的制备方法，其特征在于：硫酸钠缓冲液的pH值为7.0。
4.根据权利要求2所述低盐泡菜微生态添加剂的制备方法，其特征在于：所述磷酸盐缓冲液PBS的pH值为6.8。
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