[发明专利]一株六溴环十二烷降解菌的筛选及应用

权利要求书

1.一种六溴环十二烷降解菌株，该菌株为溶血不动杆菌(Acinetobacter haemolyticus strain HW-2)，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏号为CGMCC No.13280。

2.一种含有权利要求1所述菌株的菌剂。

3.权利要求1所述六溴环十二烷降解菌株寡养单胞菌HW-2的筛选方法，其特征在于该方法的具体步骤如下：

称取5-10g受六溴环十二烷污染的土壤样品加入到50-100mL经高温灭菌的0.85％的生理盐水中，充分涡旋后，静置10-30分钟，取5mL土壤上清液过0.45μm滤膜，取1mL滤液转接到10mg/L HBCD为唯一碳源的无机盐培养基中，于30℃，150r/min恒温摇床中培养，每周转接一次，使HBCD的最终浓度达到30mg/L，培养3周后，在LB固体培养基上用平板划线法对菌株进行分离纯化，挑选生长较快的优势菌落，反复纯化3次，得到单一纯菌落，转接到液体LB培养基中扩大培养后，提取该菌株全基因，PCR扩增后，进行16rDNA测序，将所测序列提交GenBank进行分析，鉴定该菌株与溶血不动杆菌Acinetobacter haemolyticus有最高的相似度。

4.根据权利要求3所述的六溴环十二烷降解菌株寡养单胞菌HW-2的筛选方法，其特征在于所述的无机盐培养基的组分包括：1)基础无机盐培养基：Na₂HPO₄·12H₂O 25.6g/L,KH₂PO₄ 3g/L,(NH₄)₂SO₄ 1.77g/L；2)微量元素培养基：HCl 200μL/L,CaCO₃ 0.08g/L,FeCl₃·6H₂O 0.0774g/L,MnCl₂·4H₂O 0.0115g/L,CuSO₄·5H₂O 0.00146g/L,CoCl₂·6H₂O 0.0013g/L,ZnO 0.004g/L,H₃BO₃ 0.00124g/L,EDTA Na₄·2H₂O 0.792g/L,MgCl₂·6H₂O 0.1342g/L,Na₂MoO₄·2H₂O 0.0104g/L；该无机盐培养基的pH为7.4。

5.根据权利要求3所述的六溴环十二烷降解菌株寡养单胞菌HW-2的筛选方法，其特征在于所述的LB培养基组成包括：10g/L蛋白胨，10g/L NaCl，和5g/L酵母浸粉。

6.权利要求1所述的六溴环十二烷降解菌(Acinetobacter haemolyticus strain HW-2)在六溴环十二烷降解中的应用。

7.根据权利要求6所述的六溴环十二烷降解菌的应用，其特征在于，所述的应用是指Acinetobacter haemolyticus strain HW-2菌在对HBCD的降解中的应用。

8.根据权利要求7所述的六溴环十二烷降解菌株的应用，其特征在于，所述Acinetobacter haemolyticus strain HW-2菌对HBCD具有较好的降解能力，通过探索最优条件，得出该菌株对HBCD降解的最优条件为：pH＝7，35℃，500μg/L的HBCD浓度。

9.根据权利要求7所述的六溴环十二烷降解菌的应用，其特征在于，所述寡养单胞菌对HBCD具有较好的降解能力，研究表明在pH 7，35℃，150mL培养基体积，1mg/L HBCD浓度下，38天后90％的HBCD被Acinetobacter haemolyticus strain HW-2降解。