[发明专利]一株六溴环十二烷降解菌的筛选及应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物及其修复六溴环十二烷HBCD污染的应用技术领域。涉及一株HBCD降解菌的筛选方法及其对HBCD降解方法及应用。

背景技术

六溴环十二烷(HBCD)是一种新型的溴代阻燃剂，由于其阻燃效率高，热稳定性好，所需添加量小，对材料性能影响小及价格便宜等优点，被广泛应用于电子、电器、化工、建筑、交通、纺织、石油和采矿等领域中。HBCD是仅次于PBDEs和双酚A的第三大溴代阻燃剂。HBCD主要有三种同分异构体，即α-HBCD，β-HBCD和γ-HBCD。其中，工业产品中γ-HBCD所占比例最高为75～89％，α-HBCD为10～13％，β-HBCD最少一般为<0.5～12％。

HBCD具有高亲脂性、低水溶性、低蒸气压，可沿食物链逐级放大，并可在环境中远距离迁移。土壤，水体，沉积物，大气等不同环境介质中均检测到HBCD的大量存在。HBCD对内分泌系统以及生殖系统具有毒性，同时在达到一定程度后有潜在的致癌性。可见，长期的生产、使用HBCD导致其在环境中的量不断积累，已经对人类健康及环境安全造成了严重威胁。因此，HBCD的降解已经成为全球环保工作者关注的热点问题。而目前，对于HBCD降解的研究相对较少，主要集中在化学降解、光降解、微生物降解以及一些联合降解技术。其中，微生物降解是消除环境中HBCD的重要手段，具有高效、廉价等优点，但目前关于HBCD微生物降解的研究还较少。因此，筛选高效的HBCD降解菌，并对降解菌株的生理生化特性、降解特性等进行研究，能够为受HBCD污染的土壤及水资源修复等研究提供理论依据及技术支持。

发明内容

本发明的目的是解决关于六溴环十二烷的降解问题，提供一种HBCD高效降解菌的筛选及应用。

本发明技术方案

本发明首先提供了一株HBCD高效降解菌株—溶血不动杆菌(Acinetobacter haemolyticus strain HW-2)，该菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏编号CGMCC No.12918，建议分类命名为Acinetobacter haemolyticus。

所述的Acinetobacter haemolyticus strain HW-2菌株为革兰氏阴性菌，淡黄色，呈表面隆起的乳白色不透明圆形菌落；扫描电镜下该菌为杆状，直径0.5-0.7μm×1-2μm。

上述菌株来源于天津市子牙电子垃圾污染区域土壤中，经过筛选得到。

本发明所述的筛选方法，具体步骤如下：

称取10g受HBCD污染的土壤样品加入到50-100mL经高温灭菌的0.85％的生理盐水中，充分涡旋后，静置10-30分钟，取5mL土壤上清液过0.45μm滤膜，取1mL滤液转接到10mg/L HBCD为唯一碳源的无机盐培养基中，于30℃，150r/min恒温摇床中培养，每周转接一次，使HBCD的最终浓度达到30mg/L，培养3周后，在LB固体培养基上用平板划线法对菌株进行分离纯化，挑选生长较快的优势菌落，反复纯化3次，得到单一纯菌落，转接到液体LB培养基中扩大培养后，提取该菌株全基因，PCR扩增后，进行16rDNA测序，将所测序列提交GenBank进行分析，鉴定该降解菌株为Acinetobacter haemolyticus。