[发明专利]金钗石斛化学小分子成分的相关特征指纹图谱的建立方法

权利要求书

1.一种金钗石斛的化学小分子成分的相关特征指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述相关特征指纹图谱的建立方法包括：

1)对样本容量为n的样本分别进行色谱检测，获取以化学小分子成分夏佛托苷和/或柚皮素作为参照成分的检测数据，所述n为不小于10的整数；

2)对样本分别进行指纹图谱检测，获取金钗石斛的全化学成分的指纹图谱峰面积值；

3)以色谱数据中夏佛托苷和/或柚皮素的成分含量值作为响应变量，将指纹图谱中其它成分的峰面积值作为自变量建立分析模型，进行主成分提取和回归计算，建立小分子成分与指纹图谱线性回归模型，并得到回归方程；

4)通过变量相关系数指标(Correlation Coefficient)表征自变量对回归建模的贡献程度，对应的相关系数越大的自变量的重要程度越大，获得和小分子成分密切相关的指纹图谱特征峰群，建立化学小分子成分的相关特征指纹图谱；

所述步骤3)中所述的建立分析模型包括以下步骤：

a)当色谱数据呈现超高维情形时，采用SIS(Sure Independence Screening)方法将超高维降到d维；其中，d＝n或者

b)在SIS方法降维之后，采用SCAD(Smooth Clipped Absolute Deviation)方法筛选变量。

2.如权利要求1所述的化学小分子成分的相关特征指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤1)所述的色谱检测还包括金钗石斛样品处理方法：

所述样品处理方法包括：

精密称取金钗石斛粉末，置100ml容量瓶中，每1g样品精密加体积比为75:25的甲醇-水50ml，以250W功率、40kHz频率超声处理30分钟，冷却后过滤，将滤液旋蒸浓缩至干，每1g金钗石斛粉末对应地用5ml体积比为75:25的甲醇-水溶解，上清液过0.45μm微孔滤膜，取续滤液，即得金钗石斛的小分子成分含量测定样品。

3.如权利要求1或2所述的化学小分子成分的相关特征指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤1)所述的色谱检测的检测条件包括：

含量测定色谱条件：Grace Allitima C18色谱柱；流动相采用二元梯度洗脱系统，A相：0.2％醋酸-水，B相：乙腈；以波长290nm测定柚皮素，以波长334nm测定夏佛托苷，参比波长500nm，柱温30℃；流速1.0mL/min，进样量20μL；洗脱梯度为

步骤2)所述的指纹图谱的检测条件包括：

指纹图谱色谱条件：GraceAllitima C18色谱柱，250mm×4.6mm，5μm；流动相：A相：0.4％乙酸+20mmol/L醋酸铵水溶液，B相：乙腈；梯度洗脱：0～12min：2％～15％B相，12～35min：15％～24％B相，35～45min：24％～36％B相，45～60min：36％～75％B相，60～80min：75％～95％B相；流速1.0mL/min；柱温30℃；进样量20μL；检测波长280nm。