[发明专利]金钗石斛化学小分子成分的相关特征指纹图谱的建立方法

说明书

本发明公开了一种金钗石斛的化学小分子成分的相关特征指纹图谱的建立方法，包括：1)对样本容量为n的样本分别进行色谱检测，获取以化学小分子成分夏佛托苷和/或柚皮素作为参照成分的检测数据；2)对样本分别进行指纹图谱检测，获取以金钗石斛的全化学成分的指纹图谱峰面积值；3)以色谱数据中夏佛托苷和/或柚皮素的成分含量值作为响应变量，将指纹图谱中其它成分的峰面积值作为自变量建立分析模型，建立小分子成分与指纹图谱线性回归模型；4)通过变量相关系数指标表征自变量对回归建模的贡献程度，建立化学小分子成分的相关特征指纹图谱。本发明实现了化学小分子成分含量的关联性分析，能有效鉴别、控制以及评价金钗石斛药材的质量。

技术领域

本发明属于中药成份检测分析领域，具体涉及一种金钗石斛的指纹图谱的分析建模方法。

背景技术

石斛是一种常用的滋补中药，主要为石斛属植物。石斛属植物是兰科植物中最大的一个属，包括铁皮石斛、金钗石斛、密花石斛、鼓槌石斛等多个品种。在全球范围内，约有1100多种石斛，其中在我国发现的有76种。石斛的药用历史悠久。早在古代，石斛在《神农本草经》中就被列为滋补上品，长久以来，随着时代的发展，石斛一直被人们视为珍贵的中草药，具有十分重要的滋补功效。在临床上，石斛被用于治疗多种疾病，具有增强免疫力、抗氧化、降血糖和抑制癌症等药理功效。由于人为长期无节制采挖及不合理利用石斛，其野生资源日趋减少，市场上出现了一些以假乱真、以次充好的现象。此外，由于石斛品种较多，其品种间的杂交使得其近缘的种存在性状交叉现象，分类区别比较困难。因此，有必要建立石斛的特征指纹图谱对石斛鲜品、干品的药材质量进行评价。金钗石斛(DendrobiumnobileLindley)：茎直立，肉质状肥厚，稍扁的圆柱形，长10cm～40cm，直径可达1.3cm，上部多少回折状弯曲，基部明显收狭，不分枝，具多节，节有时稍肿大；节间多少呈倒圆锥形，长2cm～4cm，干后金黄色。叶基部具抱茎的鞘。总状花序常从具叶或落叶的老茎中部以上发出，长2cm～4cm，具1朵～4朵花；花序柄长0.5cm～1.5cm，基部具数枚筒状鞘；花苞片膜质，卵状披针形，长0.6cm～1.3cm，先端渐尖；花梗和子房淡紫色，长0.3cm～0.6cm；花大，白色带淡紫色先端，有时全体淡紫红色，或除唇瓣上具一个紫红色斑块外其余均为白色；中萼片，长圆形，长2.5cm～3.5cm，宽1cm～1.4cm，先端钝，具5条脉；侧萼片与中萼片相似，先端锐尖，基部歪斜，具5条脉；萼囊圆锥形，长0.6cm；花瓣多少斜宽卵形，长2.5cm～3.5cm，宽1.8cm～2.5cm，先端钝，基部具短爪，全缘，具3条主脉和许多支脉；唇瓣宽卵形，长2.5cm～3.5cm，宽2.2cm～3.2cm，先端钝，基部两侧具紫红色条纹并且收狭为短爪，中部以下两侧围抱蕊柱，边缘具短的睫毛，两面密布短绒毛；唇瓣中央具1个紫红色大斑块；蕊柱绿色，长0.5cm，基部稍扩大，具绿色的蕊柱足；药帽紫红色，圆锥形，密布细乳突，前端边缘具不整齐的尖齿。

色谱指纹图谱是一种综合的、可量化的鉴别手段，作为一种全局分析的全景模式，反映的是样品的整体情况,而对单一化学小分子成分的含量解释不具有针对性。迄今为止，有关药用石斛HPLC指纹图谱的专利有1项(CN200810218494.5)，成金乐等对石斛中的酚类和黄酮类成分进行了HPLC指纹图谱分析。此方法适合于酚类和黄酮类这两类成分的质量控制。另一方面，在色谱指纹图谱分析过程中，很多数据都是高维的，即数据包含很多属性或特征，比如有关金钗石斛色谱指纹图谱，就能更好地对金钗石斛进行描述，但在实际应用中对高维数据直接进行操作将会面临“维数灾难”的问题，“维数灾难”会导致建模过程所需要的样本数随着维数升高而呈指数级增长。面对高维数据，常规的最小二乘方法不再适用，为了提高模型的可解释性和预测的准确度，变量选择变得很重要。如何高效地从众多的变量中筛选出对自变量有重要作用的若干个变量，是在对指纹图谱进行分析时亟需解决的问题。

另外，在现有的石斛检测标准中都是检测其中的多糖等大分子药效成分，但是，检测多糖等大分子成分需要的技术、仪器要求高，国内现有的仪器设备通常无法准确检测大分子成分，无法准确评价石斛的质量。

发明内容