[发明专利]遗传性疾病的预防/改善剂

说明书

本申请是申请日为2011年6月27日、申请号为201180030327.8、发明名称为“遗传性疾病的预防/改善剂”的中国专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及一种预防/改善剂，其特征在于，该预防/改善剂为起因于基因外显子的突变、且可使包含该突变的外显子跳跃而生成功能性截短型蛋白质的遗传性疾病的预防/改善剂，含有分子量1500以下的化合物。

背景技术

肌营养不良是肌纤维的破坏/变性(肌坏死)与再生反复发生，从而使肌肉萎缩和肌肉无力随之发展的遗传性肌肉疾病的总称，其中，进行性肌营养不良是众所周知的。属于进行性肌营养不良之一的杜氏肌营养不良(Duchenne muscular dystrophy：DMD)在肌营养不良中最为普遍，其因X染色体上的肌营养不良蛋白基因的突变而发病(参照非专利文献1)。由于幼年时期发病的进行性肌肉萎缩，DMD患者通常会在20岁左右因心力衰竭或呼吸器官衰竭而死亡。

肌营养不良蛋白质(以下也简单表示为“肌营养不良蛋白”。)存在于肌细胞的细胞膜的内侧，通过将由肌动蛋白-肌球蛋白引起的肌肉收缩所产生的机械性能量以良好的平衡传递至细胞膜、周围的结缔组织、腱等，并进行调节，以不施加过度的冲击，由此发挥保护肌细胞结构的作用。在DMD患者的情况下，由于其肌营养不良蛋白基因的突变，肌纤维中完全不存在或仅存在极少量肌营养不良蛋白，因此会因肌肉收缩而导致肌细胞的细胞膜破损，从而使比通常量更多的钙离子流入肌纤维中。过量的钙会使诱发钙蛋白酶、蛋白酶等的破坏肌肉或诱发细胞凋亡的酶活化，其结果导致成纤维细胞被活化而出现纤维化，组织形成瘢痕，肌细胞难以再生，肌肉萎缩逐渐发展。

另一方面，属于进行性肌营养不良之一的贝克氏型肌营养不良(Becker muscular dystrophy：BMD)也是因肌营养不良蛋白基因的突变而发病的，其发病时间通常为成年，症状的发展也比DMD缓慢。虽然DMD和BMD均因肌营养不良蛋白基因的突变而发病，但其症状的程度、发展速度不同。DMD和BMD的这个差别可通过读码框规则来说明。对于肌营养不良蛋白mRNA而言，产生提前终止密码子(premature termination codon：PTC)的突变(无义突变)通常会引起重度的DMD表现型(杜氏)，而维持了肌营养不良蛋白mRNA原有读码框的突变(整码突变，in-frame mutation)则会成为症状更轻的BMD表现型(贝克氏型)(参照非专利文献2)。但是，令人意外的是，报告有：虽然若干轻症BMD患者的肌营养不良蛋白基因上具有无义突变，但通过使包含该无义突变的外显子跳跃，会产生新型的读码框内的肌营养不良蛋白mRNA(参照非专利文献3～6)。由于跳跃而缺失部分外显子的该肌营养不良蛋白mRNA编码所得的肌营养不良蛋白(截短型肌营养不良蛋白)比正常的肌营养不良蛋白短，但在某种程度上残存保持肌细胞结构的功能，因此肌营养不良的症状比较轻，另外，肌肉萎缩的发展速度也变慢。

从根本上治疗肌营养不良的方法尚未确立，以往，除了功能训练、用于预防关节挛缩的伸展之外，只不过针对心力衰竭/呼吸障碍进行对症治疗。但是，近年来，本发明人等、其它研究人等开发了针对DMD的新治疗方法，备受期待。该治疗方法是通过使用肌营养不良蛋白mRNA的反义寡核苷酸(AON)诱发外显子跳跃，实现从DMD表现型向BMD表现型的转换，从而使症状减轻的方法(非专利文献3)。为了在DMD患者的细胞中诱发外显子跳跃，对于任意剪接部位或剪接促进元件设计了几种不同的AON。这些AON可以修复肌营养不良蛋白mRNA的读码框。例如，通过外显子19的外显子剪接增强子(ESE)的AON，可观察到前述DMD患者细胞中产生外显子19的跳跃、生成截短型肌营养不良蛋白(参照非专利文献3～5)。另外，外显子51的AON也多用于患者细胞，现在，这些AON还处于临床研究阶段(参照非专利文献6～8)。