[发明专利]复层可吸收生物膜的制备方法

权利要求书

1.一种复层可吸收生物膜的制备方法，其特征在于，包括：

配置硫酸软骨素乙酸溶液和胶原乙酸溶胀液；

在胶原乙酸溶胀液中加入硫酸软骨素乙酸溶液，得到胶原-硫酸软骨素浆液，在配置的过程中溶液均匀搅拌并抽真空；

将胶原硫酸软骨素溶液进行第一次真空冷冻干燥，得到具有三维结构的胶原膜；

将胶原膜压制成致密胶原膜；

将胶原硫酸软骨素溶液倒在铺有致密胶原膜的冻干盘中或直接通过胶原-硫酸软骨素浆液将胶原致密层和胶原膜粘附在一起，进行第二次真空冷冻干燥，得到具有疏松层和致密层的复合胶原膜；

复合胶原膜进行交联；

将交联后的复合胶原膜进行灭菌，得到复层可吸收生物膜；

所述将胶原膜压制成致密胶原膜包括：用压胶原机的压力均匀地分散到胶原膜上，所述压胶原机的所采用的压力为5~15兆帕，时间为1~3分钟，使胶原膜表面平整，胶原膜的压制厚度为1~2毫米，孔隙≤100微米，达到致密胶原层的要求；

所述第一次真空冷冻干燥和第二次真空冷冻干燥采用同一种真空冷冻干燥方式进行，所述真空冷冻干燥方式包括缓冻干燥或速冻干燥，所述缓冻干燥后得到的膜孔隙范围为100~250微米，所述速冻干燥后得到的膜孔隙范围为30~150微米；

所述缓冻干燥包括以下步骤：

预冻阶段，温度：3~5℃，时间：120~180分钟；

冷冻阶段，温度：-35~ -45℃，时间：310~360分钟；

抽空干燥阶段，温度：-8~ -10℃，时间：740~920分钟，真空度：0.2bar；

第一干燥阶段，温度：-10.5~ -13.5℃，时间：380~460分钟，真空度：0.2bar；

第二干燥阶段，温度：-5℃，时间：350~420分钟，真空度：0.2bar；

第三干燥阶段，温度：0℃，时间：80~90分钟，真空度：0.2bar；

第四干燥阶段，温度：20~30℃，时间：70~100分钟，真空度：0.2bar；

所述速冻干燥包括以下步骤：

冷冻阶段，温度：-38℃，时间：40分钟；

抽空干燥阶段，温度：-18℃，时间：720分钟，真空度：0.2bar；

第一干燥阶段，温度：-8℃，时间：420分钟，真空度：0.2bar；

第二干燥阶段，温度：0℃，时间：180分钟，真空度：0.2bar；

第三干燥阶段，温度：10℃，时间：180分钟，真空度：0.2bar；

第四干燥阶段，温度：24℃，时间：95分钟，真空度：0.2bar。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述硫酸软骨素乙酸溶液由如下方法配置：

将2~4克硫酸软骨素加入到500毫升浓度为0.4~0.6％乙酸溶液中，在0~10℃温度条件下，溶解，过滤得到。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述胶原乙酸溶胀液由如下方法配置：

将3~5克I型胶原蛋白加入到500毫升浓度为0.3~0.6％乙酸溶液中，混合搅拌，搅拌速度为15000~20000转/分，搅拌时间为1~2小时。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述I型胶原蛋白为牛跟腱中提取的高纯度胶原蛋白，其中I型胶原蛋白占总蛋白含量不小于99％，羟脯氨酸的含量不小于10％。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述在胶原乙酸溶胀液中加入硫酸软骨素乙酸溶液，得到胶原-硫酸软骨素浆液，在配置的过程中溶液均匀搅拌并抽真空包括：将200~500毫升硫酸软骨素乙酸水溶液缓慢加入到胶原乙酸溶胀液中，搅拌速度为15000~20000转/分，搅拌时间为1~2小时，将溶液抽真空，得到胶原-硫酸软骨素浆液。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述将胶原硫酸软骨素溶液进行第一次真空冷冻干燥的方法为：

将胶原-硫酸软骨素浆液倒到不锈钢冻干盘中，轻摇使其分布均匀，控制其厚度在2~5毫米，进行真空冷冻干燥。