[发明专利]一种转化解脂耶氏酵母及其构建方法与应用

权利要求书

1.一种转化解脂耶氏酵母，其特征在于，包括如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列，用于实现饲料用脂肪酶与单细胞蛋白的联产；

上述酵母可利用的碳源包括：蔗糖、甘油或糖蜜。

2.如权利要求1所述的转化解脂耶氏酵母，其特征在于，所述解脂耶氏酵母的蛋白质含量为60％～62.6％。

3.如权利要求1所述的转化解脂耶氏酵母，其特征在于，在5％碳源的YPD液体培养基、装液量10％、转速250rpm、培养温度28℃、以及培养时间84h的培养条件下，所述转化解脂耶氏酵母的干重为32g/L～39g/L，饲料用脂肪酶的产量为3200U/ml～5900U/ml。

4.如权利要求1-3中任意一项所述的转化解脂耶氏酵母的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将饲料用脂肪酶基因连接至表达载体上，获得重组质粒；所述饲料用脂肪酶基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示；

(2)将重组质粒线性化，并转化解脂耶氏酵母的营养缺陷型感受态细胞；

(3)筛选转化后的营养缺陷型感受态细胞，获得所述转化解脂耶氏酵母。

5.如权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述表达载体为pINA1317载体或pINA1297载体。

6.如权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述营养缺陷型为尿嘧啶营养缺陷型，所述步骤(3)中的筛选方法为：利用无氨基酸培养基培养转化后的营养缺陷型感受态细胞。

7.如权利要求6所述的构建方法，其特征在于，所述无氨基酸培养基为YNBD无氨基酸固体培养基。

8.如权利要求1-3中任意一项所述的转化解脂耶氏酵母在饲料用脂肪酶与单细胞蛋白的联产中的应用。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，将所述转化解脂耶氏酵母在YPD液体培养基中20℃～30℃发酵12h～240h。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述YPD液体培养基包括2％～5％的碳源，所述碳源为蔗糖、甘油或糖蜜。