[发明专利]固相萃取-原子荧光光谱法测定蜂蜜和果汁中硒形态的方法

说明书

本发明公开了固相萃取‑原子荧光光谱法测定蜂蜜和果汁中硒形态的方法。利用SCX固相萃取柱在pH为3的条件下对蜂蜜或果汁中有机硒和无机硒进行分离处理，然后加混合酸消化分离得到的无机硒提取液，后经原子荧光光谱法测定硒元素，另用湿法消解测定总硒含量，最后差减法得到有机硒含量。本发明测定硒形态的方法，是利用离子吸附交换、酸消解和原子荧光光谱法等技术的结合，实现准确有效的无机硒和有机硒的分离测定。方法简便，环保、高效，为富硒蜂蜜和果汁的功能性和安全性评价提供了有力的技术支持。

技术领域

本发明属于荧光光谱检测技术领域，具体涉及一种固相萃取-原子荧光光谱法测定蜂蜜和果汁中硒形态的方法。

背景技术

硒是维持人和动物正常生命活动的必需微量元素，硒元素的生物活性与其化学形态有重要关系，如六价硒酸过量会导致有机生物体的中毒反应，而硒代胱氨酸等有机硒有延缓衰老的功效。硒的形态分为有机硒和无机硒，其中无机硒包括亚硒酸和硒酸，有机硒包括硒代胱氨酸、硒代蛋氨酸、硒硫蛋白等形式。蜂蜜中的有机硒主要为硒代蛋氨酸（SeMet）、硒代半胱氨酸（SeCys）、硒糖等形式，而其中的无机硒主要为亚硒酸（SeO₃^2-）、硒酸（SeO₄^2-）等。

富硒蜂蜜是通过蜜蜂的代谢，天然成熟而富含较高生物活性的有机硒蜂蜜，可作为有机硒补充剂，具有比普通蜂蜜更强的抗癌、排毒、提高免疫力等保健功能，因此其在市场上流通的价格更高。但由于目前对蜂蜜等食品中硒的检测一般是测定总硒，不能分辨有机硒和无机硒，在利益的趋势下，有些生产者会向蜂蜜中添加无机硒冒充富硒蜂蜜。这种行为不仅破坏了蜂蜜市场的信用和秩序，更会引起中毒，危害食用者的身体健康。各种富硒果汁也同样存在类似的问题，由于消费者对富硒产品的功能性有一定程度的认可，富硒果汁的价格远高于普通果汁，但如果被不法添加了过量的无机硒，也会伤害食用者的健康。因此准确分析有机硒和无机硒含量的方法，对评价饮品中硒的作用，防止无机硒过量造成的危害是非常重要的。目前对食品中硒形态分析的主要手段有有机试剂提取-光谱分析、色谱-光谱检测联用技术，如HPLC，CE或GC等作为分离手段，ICP-MS，AAS，AFS和ICP- OES等。但由于蜂蜜的组织状态粘稠，利用有机试剂很难真正提取出有机硒，影响了硒形态测定的准确性。而利用色谱-光谱检测联用技术时，蜂蜜不能经过消解，只能通过简单溶解稀释后进样。蜂蜜中大量的糖类、蛋白等在进样时一起进入仪器，会严重污染仪器的进样系统，因此该方法目前还没有应用于蜂蜜中硒形态的测定。

发明内容

为了实现蜂蜜和果汁中硒形态的准确测定，本发明提供一种固相萃取-原子荧光光谱法测定蜂蜜和果汁中硒形态的方法。

一种固相萃取-原子荧光光谱法测定蜂蜜和果汁中硒形态的方法，利用强阳离子交换柱在pH值3的条件下，对蜂蜜或果汁进行固相萃取分离处理，得到无机硒的提取液；用混合酸消化提取液，去除了有机物，然后以原子荧光光谱法测定，得到蜂蜜或果汁中的无机硒含量；另用湿法消解-原子荧光光谱法测定蜂蜜或果汁中的总硒；再用差减法得到蜂蜜或果汁中的有机硒的含量。

进一步限定的技术方案如下：

一种固相萃取-原子荧光光谱法测定蜂蜜和果汁中硒形态的具体操作步骤如下：

（1）无机硒的测定

在2-5 g被测样品（精确到0.01g）中加入20mL蒸馏水，涡旋混匀；

用浓度1 mol/L的盐酸溶液调pH值为3，加水定容至10-25 mL；

取10 mL定容的溶液，过固相萃取柱，在负压状态下收集滤液，得到无机硒的提取液；