[发明专利]一种黄秦艽药材指纹图谱的建立方法及其指纹图谱有效
申请号: | 201611226646.7 | 申请日: | 2016-12-27 |
公开(公告)号: | CN106770771B | 公开(公告)日: | 2020-01-21 |
发明(设计)人: | 李竣;龚韦凡;黄先菊;梅枝意;余有;杨光忠 | 申请(专利权)人: | 中南民族大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
代理公司: | 11228 北京汇泽知识产权代理有限公司 | 代理人: | 程殿军;张瑾 |
地址: | 430074 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 流动相 秦艽 指纹图谱 液相色谱检测 醇提物 药材指纹图谱 体积百分数 定性检测 含量测定 磷酸溶液 梯度洗脱 分离度 色谱峰 甲醇 色谱 制备 药材 记录 | ||
1.一种黄秦艽药材指纹图谱的建立方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)、以黄秦艽制备黄秦艽醇提物;
(2)、将步骤(1)得到的所述黄秦艽醇提物进行液相色谱检测,记录90min内的指纹图谱:
其中,所述液相色谱检测中的流动相包括流动相A和流动相B,所述流动相A为甲醇,所述流动相B为0.01%~0.1%磷酸溶液,所述流动相A和流动相B的体积百分数之和为100%;流动相的流速为:0.8~1.2mL/min;
所述液相色谱检测的洗脱程序为梯度洗脱,所述梯度洗脱为:
0~5min,所述流动相A的体积百分数从7%~9%上升至17%~19%,所述流动相B的体积百分数从91%~93%下降至81%~83%;
5~20min,所述流动相A的体积百分数从17%~19%上升至29%~31%,所述流动相B的体积百分数从81%~83%下降至69%~71%;
20~45min,所述流动相A的体积百分数从29%~31%上升至30%~32%,所述流动相B的体积百分数从69%~71%下降至68%~70%;
45~50min,所述流动相A的体积百分数从30%~32%上升至37%~39%,所述流动相B的体积百分数从68%~70%下降至61%~63%;
50~55min,所述流动相A的体积百分数从37%~39%上升至40%~42%,所述流动相B的体积百分数从61%~63%下降至58%~60%;
55~82min,所述流动相A的体积百分数从40%~42%上升至41%~43%,所述流动相B的体积百分数从58%~60%下降至57%~59%;
82~83min,所述流动相A的体积百分数从41%~43%下降至7%~9%,所述流动相B的体积百分数从57%~59%上升至91%~93%;
83~90min,所述流动相A的体积百分数保持在7%~9%,所述流动相B的体积百分数保持在91%~93%;
所述液相色谱检测的检测器为紫外检测器;紫外检测波长为254nm;
所述液相色谱检测中的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,色谱柱柱长为250mm,内径为4.6mm,粒径为5μm;
所述液相色谱检测中的色谱柱柱温为30℃。
2.根据权利要求1所述的黄秦艽药材指纹图谱的建立方法,其特征在于,步骤(1)为:黄秦艽药材用90%~100%甲醇溶液回流提取2~4次,每次3~5小时,过滤,合并提取液,减压浓缩,得黄秦艽醇提物。
3.根据权利要求2所述的黄秦艽药材指纹图谱的建立方法,其特征在于,步骤(1)为:黄秦艽药材用80%甲醇溶液回流提取3次,每次4小时,过滤,合并提取液,减压浓缩,得黄秦艽醇提物。
4.根据权利要求2所述的黄秦艽药材指纹图谱的建立方法,其特征在于,所述流动相B为0.05%磷酸溶液。
5.根据权利要求4所述的黄秦艽药材指纹图谱的建立方法,其特征在于,所述梯度洗脱为:
0~5min,所述流动相A的体积百分数从8%上升至18%,所述流动相B的体积百分数从92%下降至82%;
5~20min,所述流动相A的体积百分数从18%上升至30%,所述流动相B的体积百分数从82%下降至70%;
20~45min,所述流动相A的体积百分数从30%上升至31%,所述流动相B的体积百分数从70%下降至69%;
45~50min,所述流动相A的体积百分数从31%上升至38%,所述流动相B的体积百分数从69下降至62%;
50~55min,所述流动相A的体积百分数从38%上升至41%,所述流动相B的体积百分数从62%下降至59%;
55~82min,所述流动相A的体积百分数从41%上升至42%,所述流动相B的体积百分数从59%下降至58%;
82~83min,所述流动相A的体积百分数从42%下降至8%,所述流动相B的体积百分数从58%上升至92%;
83~90min,所述流动相A的体积百分数保持在8%,所述流动相B的体积百分数保持在92%。
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