[发明专利]一种评价人乙型肝炎病毒X蛋白结合分子的方法有效
| 申请号： | 201611226738.5 | 申请日： | 2016-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN108239657B | 公开（公告）日： | 2022-11-08 |
| 发明（设计）人： | 谢幼华;谷陈建;刘晶;陶帅;潘少坤 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C07K19/00 |
| 代理公司： | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人： | 吴桂琴 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 评价 乙型肝炎 病毒 蛋白 结合 分子 方法 | ||
1.一种评价人乙型肝炎病毒X蛋白（HBx蛋白）结合分子的方法在用于筛选和鉴定HBx蛋白的结合分子的制品中的用途，所述用途是非治疗或诊断的目的；
其中所述的评价人乙型肝炎病毒X蛋白（HBx蛋白）结合分子的方法包括，在细胞内表达分泌型的包含HBx蛋白和荧光素酶NanoLuciferase（Nluc）两者的重组融合蛋白，通过检测分泌的融合蛋白的萤光素酶活性，量化分泌的HBx蛋白的水平；
所述的重组融合蛋白为分泌型，包括HBx蛋白和Nluc荧光素酶，两者之间采用柔性氨基酸序列连接，HBx蛋白位于重组融合蛋白的氨基端或者羧基端；所述的柔性氨基酸序列富含甘氨酸的链接序列GGGGSGGGGSGGGGS；
编码所述的重组融合蛋白的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO. 1所示或SEQ ID NO. 2所示，其表达的重组融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO. 3或SEQ ID NO. 4所示。
2.一种评价人乙型肝炎病毒X蛋白（HBx蛋白）结合分子的方法在用于研制HBx蛋白的靶向药物中的用途，
其中所述的评价人乙型肝炎病毒X蛋白（HBx蛋白）结合分子的方法包括，在细胞内表达分泌型的包含HBx蛋白和荧光素酶NanoLuciferase（Nluc）两者的重组融合蛋白，通过检测分泌的融合蛋白的萤光素酶活性，量化分泌的HBx蛋白的水平；
所述的重组融合蛋白为分泌型，包括HBx蛋白和Nluc荧光素酶，两者之间采用柔性氨基酸序列连接，HBx蛋白位于重组融合蛋白的氨基端或者羧基端；所述的柔性氨基酸序列富含甘氨酸的链接序列GGGGSGGGGSGGGGS；
编码所述的重组融合蛋白的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO. 1所示或SEQ ID NO. 2所示，其表达的重组融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO. 3所示或SEQ ID NO. 4所示。
3.一种重组融合蛋白的基因表达载体，其特征在于，该表达载体转染细胞后表达和分泌氨基酸序列如SEQ ID NO. 3或SEQ ID NO. 4所示的重组融合蛋白。
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