[发明专利]一种利用肽核酸和纳米金免标记比色检测原癌基因c‑mycmRNA的方法在审
申请号: | 201611227729.8 | 申请日: | 2016-12-27 |
公开(公告)号: | CN106834440A | 公开(公告)日: | 2017-06-13 |
发明(设计)人: | 乔海燕;代晓玉;曹祖斌;李霞 | 申请(专利权)人: | 辽宁石油化工大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;G01N21/33 |
代理公司: | 辽宁沈阳国兴知识产权代理有限公司21100 | 代理人: | 姜婷婷 |
地址: | 113001 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 核酸 纳米 标记 比色 检测 基因 mycmrna 方法 | ||
1.一种利用肽核酸和纳米金免标记比色检测原癌基因c-myc mRNA的方法,其特征在于包括下述步骤:首先在合成的酒红色纳米金溶液中加入PNA,此时溶液的颜色为蓝色,同时观察紫外吸收光谱,当加入原癌基因c-myc mRNA的有效序列与PNA杂交后,溶液的颜色又变回酒红色,同时紫外吸收光谱也恢复,由此,低达50nM靶RNA肉眼即能够检测出。
2.根据权利要求1所述的一种利用肽核酸和纳米金免标记比色检测原癌基因c-myc mRNA的方法,其特征在于所述的纳米金(AuNPs)的合成过程为:
步骤1、取HAuCl4·3H2O配制50mL浓度为0.01%HAuCl4水溶液;
步骤2、取柠檬酸钠配制1mL浓度为1%柠檬酸钠水溶液;
步骤3、将50mL 0.01%HAuCl4水溶液加热到沸腾,剧烈搅拌下加入1.0mL1%柠檬酸钠水溶液,恒温加热搅拌15min,停止加热继续搅拌至室温,即得酒红色AuNPs溶液。
3.根据权利要求2所述的一种利用肽核酸和纳米金免标记比色检测原癌基因c-myc mRNA的方法,其特征在于所述的AuNPs溶液的浓度为0.45nM;AuNPs粒径为13.2±0.5nm。
4.根据权利要求1所述的一种利用肽核酸和纳米金免标记比色检测原癌基因c-myc mRNA的方法,其特征在于所述的PNA为在C端和N端未修饰的12个碱基的肽核酸序列:
12-mer PNA(N'-GCA TCG TCG CGG-C')。
5.根据权利要求1所述的一种利用肽核酸和纳米金免标记比色检测原癌基因c-myc mRNA的方法,其特征在于所述的原癌基因c-myc mRNA的有效序列为:
5’-CCG CGA CGA UGC-3’(RNAcom)。
6.根据权利要求1所述的一种利用肽核酸和纳米金免标记比色检测原癌基因c-myc mRNA的方法,其特征在于所述的单个碱基错配的RNA序列:
5’-CCG CGA GGA UGC-3’(RNAmis)。
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