[发明专利]游离载体将血液变成皮肤用于治疗严重皮肤损伤的方法

权利要求书

1.游离载体将血液变成皮肤用于治疗严重皮肤损伤的方法，其特征在于：它的具体方法为：步骤一：将血液转化为皮肤的游离载体，用含有10-300ng/ml细胞因子SCF、TPO、FL、用商业试剂盒将表达转分化因子如OCT4，KLF4和p63的游离载体以核转染的方式转染细胞，在转染后的前4-7天，用造血细胞培养基和表皮细胞培养基以1:1方式配制混合培养基培养细胞，用于皮肤干细胞培养的培养基是商用角质形成细胞培养基加ALK5抑制剂，BMP7，KGF-1和EGF,转染后4-7天，将细胞在100％皮肤干细胞培养基中培养2周，离体培养2-3周后，80-90％的细胞丧失游离载体；为了防止游离载体用于细胞治疗的任何潜在的安全性问题，通过施用更昔洛韦1-2天杀死剩余的10％的携带游离载体的细胞，即为皮肤干细胞；

步骤二：皮肤干细胞的移植，在移植之前，将血液转变的皮肤干细胞以10⁴-10⁵/cm²密度种植到交联的人胶原蛋白上，用5-10mg/ml胶原蛋白制备胶原片，为了提高细胞存活和加速新生血管形成，将VEGF，KGF-1和EGF包埋到胶原片中，再将细胞种植到胶原片上4-24小时后，在手术清创后将移植物涂覆至损伤的皮肤，1个月内将实现快速无疤痕愈合，移植一个月后，交联的胶原被迁移的免疫细胞和分化的表皮细胞降解。

2.按照权利要求1所述的游离载体将血液变成皮肤用于治疗严重皮肤损伤的方法，其特征在于：所述的步骤一制备的皮肤干细胞用在含有聚N-异丙基丙烯酰胺的智能表面移植无基质的衍生皮肤细胞这一细胞片技术。