[发明专利]一种辐照水产干制品的检测方法

说明书

本发明公开了一种辐照水产干制品的检测方法，包括样品前处理、QTRAP‑UPLC‑MS/MS检测分析及辐照剂量定量检测步骤。本发明可同时分离多种氨基酸及其同分异构体，并对其进行定性、定量及二次定性，能判断水产干制品是否经过辐照且对辐照剂量定量，结果可靠、检测限低、适用于辐照水产干制品快速检测。

技术领域

本发明涉及水产品检测技术领域，特别涉及一种辐照水产干制品的检测方法。

背景技术

食品辐照是利用电离辐射(⁶⁰Co或¹³⁷Cs放射源产生的射线、电子加速器产生的低于10MeV电子束或X射线)对食品进行加工处理，利用电离辐射在食品中产生的辐射化学和辐射生物学效益，以达到控制食源性病原体，减少微生物负载和虫害，抑制生理过程和延长货架期的目的。因其具有冷加工处理、无二次污染和化学残留、能耗低等特点，在食品包装材料、粮食、水果等杀虫、灭菌等领域有着广泛的应用。另据研究表明，辐照技术对真菌毒素、农药、渔药等食品污染物也具有一定的抑制和降解作用。由于水产品具有容易腐败、储藏难等缺点，近年来，辐照技术被广泛应用于水产品加工、运输及储存过程中的杀菌保鲜，成为世界上除了香辛料、根茎类植物外主要的辐照处理食品。

辐照食品的潜在安全性问题一直存在争议，不当的辐照会对食品的颜色、味道、营养产生一些副作用，比如脱色、有臭味、破坏蛋白质、脂肪等营养成分。目前，世界各国对辐照食品均持相当严格和谨慎的态度，尤其是辐照食品管理中标识的问题已得到欧盟各国及日、韩等国的重视。目前，美国、英国、德国等国家对食品辐照有比较详细的要求，对于食品种类、辐照剂量、辐照设施、食品辐照的标示都有明确的规定。欧盟有关食品辐照的指令即“离子照射处理的食品”的框架指令1999/2/EC规定，所有经辐照的食品或含有辐照食品成分的必须在食品标签上标明；执行指令1999/3/EC规定在欧盟允许辐照的食品目前只允许辐照处理草药、香料和植物调味料一类物质。

目前，辐照检测方法均建立在对不同种类食品经辐照后产生的特定的衍生物检测的基础上，受方法本身采用的原理所限，每种方法均适用于特定类型的样品。见下表1。

表1不同辐照检测方法比较

含脂食品被辐照时，食品中的脂肪酸和酰基甘油会分解形成相应的同碳原子数2-烷基环丁酮(2-alkylcyclobutanones，2-ACBs)。自发现以来，2-ACBs一直是含脂辐照食品研究的热点。作为含脂食品辐照的标志性化合物，2-ACBs可用来检测含脂辐照食品。但是大部分水产品脂肪含量较低，因此通过检测2-十二烷基环丁酮判定是否经过辐照不适用于辐照水产品的检测。辐照检测的另一种常用方法热释光分析法(TL)可用来检测能分离出矿物质的食品是否经过辐照处理。但是部分水产制品因其加工过程中经过了去内脏、去壳、蒸煮，尤其是多次漂洗，如鱿鱼丝、鱼肉等产品，实际检测过程中很难提取到足够量的矿物质用于检测，热释光分析法在该类产品是否经过辐照检测的应用中有一定的难度；另外该法存在假阴性的问题；其发光曲线无法对辐照剂量进行定量。因此，目前还缺乏针对辐照水产品检测的标准化方法，尤其是辐照剂量定量检测的方法。

苯丙氨酸是带有芳香环的中性氨基酸(见结构式1)，在pH 7.0条件下因羧基端带负电，氨基端带正电而使整个分子呈电中性，其在细胞中可以游离形式或通过肽键结合存在于蛋白质中。食品中的水经辐照后，会生成羟基自由基、氢自由基、氢离子和水合电子，其中羟基自由基会进攻含芳环的苯丙氨酸的邻、间、对位，进而生成三种相应的羟基化合物，即酪氨酸三种异构体-对酪氨酸(p-Tyrosine，结构式2)、邻酪氨酸(o-Tyrosine，结构式4)和间酪氨酸(m-Tyrosine，结构式3)。其中，对酪氨酸较为常见，且在基体本身中均有大量存在。而间位酪氨酸(间-酪氨酸，3-羟基苯丙氨酸或LM-酪氨酸)和邻位酪氨酸(邻-酪氨酸或2-羟基苯丙氨酸)，两者虽自然存在，但皆为罕见，须经由苯丙氨酸的氧化压力条件下进行的非酶自由基羟化而产生。