[发明专利]柠檬酸产量提高的重组霉菌的构建方法及应用有效
申请号: | 201611236665.8 | 申请日: | 2016-12-28 |
公开(公告)号: | CN106754435B | 公开(公告)日: | 2020-04-21 |
发明(设计)人: | 刘龙;殷娴;陈坚;堵国成;李江华 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/15 | 分类号: | C12N1/15;C12P7/48;C12R1/685;C12R1/69;C12R1/66 |
代理公司: | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人: | 杨慧林 |
地址: | 214000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 柠檬酸 产量 提高 重组 霉菌 构建 方法 应用 | ||
1.一种柠檬酸产量提高的重组霉菌的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)构建HGT1蛋白表达框,所述HGT1蛋白表达框包含组成型启动子、与所述组成型启动子连接的HGT1蛋白编码基因以及与所述HGT1蛋白编码基因连接的终止子;所述HGT1蛋白编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;
(2)构建抗性基因表达框,所述抗性基因表达框包含组成型启动子、与所述组成型启动子连接的hph基因以及与所述hph基因连接的终止子;
(3)将步骤(1)所述HGT1蛋白表达框和步骤(2)得到的所述抗性基因表达框转化到霉菌中,所述霉菌为黑曲霉,得到所述重组霉菌。
2.根据权利要求1所述的柠檬酸产量提高的重组霉菌的构建方法,其特征在于:在步骤(1)中和步骤(2)中,所述组成型启动子为PgpdA启动子、gpdA启动子、Pmbf启动子或Pgla启动子。
3.根据权利要求1所述的柠檬酸产量提高的重组霉菌的构建方法,其特征在于:在步骤(1)和步骤(2)中,所述终止子为trp终止子。
4.一种由权利要求1-3中任一项方法构建的重组霉菌。
5.根据权利要求1-3中任一项方法构建的重组霉菌在发酵生产柠檬酸中的应用。
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