[发明专利]黑曲霉麸曲的制备方法

权利要求书

1.黑曲霉麸曲的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将黑曲霉接种于PDA斜面培养基上活化，在37℃下培养6天，得到黑曲霉斜面菌种；

(2)将步骤(1)中培养好的斜面菌种使用适量无菌水将孢子洗下，制成活菌数0.5×10⁷～1×10⁸个/mL的孢子悬液，待用；

(3)将麸曲原料麸皮放入洗面筋机中，加入清水，开启洗面筋机，功率2～5kw，运行5min后，打开放水口，放出洗水；再加入清水，反复操作5次，将原料清洗完成；

(4)将步骤(3)中清洗完成的原料，转入离心机，设定离心机转速频率30Hz，运行2min，此时原料中水分含量为68％；

(5)将步骤(4)中的原料按每钢瓶1300g分装至20L培养钢瓶中，旋紧内盖，并用纱布包扎好接种进气口和出料口软管，送入高压灭菌锅内，121℃灭菌60min；

(6)灭菌结束后，待钢瓶温度降至室温，用无菌针管或无菌吸管，将步骤(2)中制作的孢子悬液，按料液比1500g麸皮：20mL孢子悬液，通过接种进气口在无菌火焰下接入钢瓶内，并包扎好纱布；

(7)将步骤(6)中接入黑曲霉的钢瓶横卧放置在独轴旋转式摇瓶机上，摇瓶机设定频率为25Hz，培养间温度37℃，培养8天；

(8)待麸曲培养结束，将培养合格的麸曲钢瓶从摇床上取下，旋紧外盖后送往种子罐准备接种；

(9)接入种子罐的具体操作如下：①取下钢瓶接种进气口处的纱布，接上无菌空气软管，并用喉箍固定；②取下钢瓶出料软管口处的纱布，将软管接上种子罐接种口，并用喉箍固定；③开无菌空气管阀门，使无菌空气从接种进气口进入钢瓶内，并用无菌空气将培养钢瓶内部的麸曲吹入种子罐内，持续5min；④取下接种进气口处无菌空气管道，换接无菌水管道，并用喉箍固定；⑤开无菌管水阀门，用无菌水冲洗培养钢瓶内部，持续5min，将钢瓶内残余麸曲冲洗进入种子罐；⑥冲洗完成后，取下接种钢瓶，送入灭菌锅内，于121℃灭菌15min；

(10)待钢瓶灭活完成并将至室温，将钢瓶内、外盖以及出料管道拆卸清洗，更换内盖过滤介质，放入洗瓶机中清洗、备用；

其中，所述黑曲霉麸曲专用培养钢瓶为圆柱体，容积20L，包括钢瓶主体、出料口、设置在钢瓶顶部中央的进料口、设置在钢瓶肩部的接种进气口，以及与进料口相匹配、可拆卸的瓶盖；其中，出料口设置于钢瓶底部或钢瓶肩部，从出料口向钢瓶内部连有一条伸入钢瓶底部的管道，出料口连有一个可拆卸的接头，所述接头通过螺纹旋拧固定在钢瓶肩部；所述培养钢瓶为304不锈钢材质，内径和高度比为27:37；

所述瓶盖采用通气内盖和密封外盖双盖结构；内盖采用上下双层支撑骨架结构；两层支撑骨架之间为过滤通气介质，用上层支撑骨架将所述过滤通气介质通过内盖内壁螺纹旋紧固定于下层支撑骨架上；其中，所述支撑骨架采用“井”字形或田字格设计；外盖通过内丝螺纹与内盖上相匹配的外丝螺纹旋紧固定；其中，所述过滤通气介质包括无纺布、超细玻璃纤维纸、静电纺纳米纤维网。