[发明专利]一种多价肺炎球菌荚膜多糖结合疫苗的制备方法

权利要求书

1.一种多价肺炎球菌荚膜多糖结合疫苗的制备方法，其特征在于，在肺炎球菌荚膜多糖-蛋白结合物与佐剂进行吸附的过程中：先将吸附率较低的血清型肺炎球菌荚膜多糖-蛋白结合物与铝佐剂进行吸附，再将其他血清型肺炎球菌荚膜多糖-蛋白结合物与铝佐剂进行吸附；具体包括如下顺序的步骤：

S1、向配置容器中加入0.15mol/L氯化钠溶液；

S2、向氯化钠溶液中加入0.5~2%聚山梨酯80得到溶液1，使聚山梨酯80的终浓度为0.005-0.02%；

S3、向溶液1中加入浓度为1~2mg/mL的铝佐剂溶液得到溶液2，使铝佐剂的终浓度为0.1~0.25mg/mL；

S4、配制13价肺炎球菌荚膜多糖-蛋白结合物的混合液1及混合液2，混合液1包含吸附率较低的5种血清型：5、6A、6B、18C、19F，混合液2包含血清型：1、3、4、7F、9V、14、19A、23F，向溶液2中先加入混合液1，吸附30~120分钟后，再加入混合液2，继续吸附16~24小时，得到溶液3；

S5、向溶液3中加入浓度为0.1~1M、pH为5~7的琥珀酸溶液，调节体系pH为5.4~7.4，并使琥珀酸的终浓度为0.5~5mM，即得多价肺炎球菌荚膜多糖结合疫苗；

所述肺炎球菌荚膜多糖-蛋白结合物为多种；所述肺炎球菌荚膜多糖-蛋白结合物为肺炎球菌荚膜多糖和载体蛋白经共价连接形成的复合物，其中，所述肺炎球菌荚膜多糖的血清型为1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F和23F型，所述载体蛋白为DT、TT或CRM₁₉₇；

所述铝佐剂为磷酸铝佐剂和/或氢氧化铝佐剂。

2.一种多价肺炎球菌荚膜多糖结合疫苗，其特征在于，所述疫苗由权利要求1所述的制备方法制备而成。

3.根据权利要求2所述的疫苗，其特征在于，所述疫苗含有多种血清型肺炎球菌荚膜多糖，其中，6B型肺炎球菌荚膜多糖的浓度为8±1.6μg/mL，其余血清型肺炎球菌荚膜多糖的浓度为4±0.8μg/mL。