[发明专利]提高罗汉果中角鲨烯含量的方法

权利要求书

1.一种提高罗汉果中角鲨烯含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、将罗汉果外植体在含有茉莉酸甲酯的固体培养基中进行组织培养后得到罗汉果苗；

其中，固体培养基中包括MS、1.5mg/L 6-苄氨基腺嘌呤、0.3mg/L吲哚丁酸、3.5g/L琼脂、30g/L蔗糖、50～400μmol/L茉莉酸甲酯、1.0g/L活性炭、0.05mg/L多胺和0.005mg/L生物活性肽；

将罗汉果外植体在含有茉莉酸甲酯的固体培养基中进行组织培养前，将罗汉果外植体在MS培养基中培养，当培养出的小苗长至6cm高时进行切段，每段带一个节间且长0.3～0.6cm，将中间健壮部位的一段接种到MS培养基中上进行继代培养，如此反复继代5～6次，然后转入含有茉莉酸甲酯的固体培养基中培养；

罗汉果外植体为剪取约40～55cm的罗汉果嫩梢，用无菌水冲洗后用体积分数为50％的异丙醇溶液冲淋，然后浸入质量分数为0.01％的过氧化氢溶液中2min，取出后再用无菌水冲洗干净，切取0.5～1mm的茎尖分生组织后得到；

S2、栽培罗汉果苗，期间将50～400μmol/L的茉莉酸甲酯溶液喷洒于授粉10～20d后的罗汉果苗的表面至表面滴水。

2.如权利要求1所述的提高罗汉果中角鲨烯含量的方法，其特征在于，步骤S1中，在含有茉莉酸甲酯的固体培养基中的培养条件为相对湿度60～66％、光照强度1400lux、光照时间8h/d，在温度为21～25℃下培养30d。

3.如权利要求1所述的提高罗汉果中角鲨烯含量的方法，其特征在于，步骤S1中，所述固体培养基是将0.22μm的微孔滤膜灭菌后的茉莉酸甲酯母液添加到固体培养基中，对固体培养基灭菌并冷却至24～26℃；

所述茉莉酸甲酯母液为用质量分数为2％的乙醇溶解茉莉酸甲酯，配制成茉莉酸甲酯浓度为50mmol/L的茉莉酸甲酯母液。

4.如权利要求1所述的提高罗汉果中角鲨烯含量的方法，其特征在于，步骤S2中，将所述茉莉酸甲酯溶液喷洒于罗汉果苗时，早、中、晚各喷洒一次，连续喷施10d。

5.如权利要求1所述的提高罗汉果中角鲨烯含量的方法，其特征在于，MS培养基中包括MS、0.5mg/L 6-苄氨基腺嘌呤、0.1mg/L吲哚乙酸、3.5g/L琼脂、8g/L蔗糖、5g/L木糖醇以及1g/L茶多糖。

6.如权利要求1所述的提高罗汉果中角鲨烯含量的方法，其特征在于，步骤S2中栽培罗汉果苗的过程具体包括：

1)选择坡度为10～20°的坡地，在坡地中按0.08～0.1kg/m²施生石灰，1个月后在坡地中每亩施农家肥1000～1500公斤和复合肥15～20公斤，放置5～10天后移栽；

2)在4月下旬进行移栽，将长为5～6cm的罗汉果苗连同营养杯一起放在种植坑中，罗汉果苗的株距为1.5～2m，按照每15株雌株配1株雄株均匀分布，用泥土盖至罗汉果苗的基部，压实并浇定根水；

3)罗汉果苗长到40cm前每天浇水1～2次，之后1～2天浇水1次；

4)移栽3～7天后，按照每株0.5～1公斤施混合肥一次，以后每10天施混合肥一次，施足5次，开花时叶面喷施一次0.01mg/L多胺和0.005mg/L生物活性肽的混合液，授粉10～20d后喷施茉莉酸甲酯溶液，所述混合肥中包括100公斤清水、腐熟农家肥8～15公斤、0.2～0.5公斤硫酸钾以及0.1～0.3公斤磷酸二氢钾，所述腐熟农家肥中人畜粪便与绿肥的质量比为6:1。