[发明专利]抗人PD-1的单克隆抗体及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种抗人PD‑1的单克隆抗体及其制备方法和应用。商品化抗PD‑1单克隆抗体功能也比较单一，或只能做免疫印迹实验，或只能做免疫组化、流式等实验，浪费人力物力和时间，不利于开展科研实验和临床试验。本发明提供的抗人PD‑1单克隆抗体既可以靶向结合人的PD‑1蛋白也可以作为ELISA、Western blot、免疫组化等科研试剂，应用性极强。

技术领域

本发明涉及生物医药和诊疗领域，具体涉及一种抗人PD-1的单克隆抗体及其制备方法和应用。

背景技术

程序性细胞死亡因子(programmed cell death 1，PD-1)是一种共刺激分子，属于CD28/CTLA4家族。PD-1通过与程序性细胞死亡因子配体1或者2(programmed cell deathligand 1 or 2，PD-L1或PD-L2)结合后，招募并激活蛋白络氨酸磷酸酶等激活信号通路，对T细胞免疫起到负相调节的功能。PD-1还可以通过抑制辅助性T细胞间接影响体液免疫或者直接通过与B细胞上的PD-L结合影响抗体分泌。PD-1/PD-L1信号异常可以引起体内免疫微循环失去稳态，导致自身免疫性疾病或者肿瘤发生。

商品化抗PD-1单克隆抗体功能也比较单一，或只能做免疫印迹实验，或只能做免疫组化、流式等实验，浪费人力物力和时间，不利于开展科研实验和临床试验。比如Abacamanti-PD1 antibody(ab36151)用于ELISA与WB，而常见地，Abacam anti-PD1antibody【J43】(ab95791)用于Flow Cyt。

抗原的表位分为线性表位和空间表位，免疫印迹(western blot)检测的是抗原的线性表位，而免疫组化检测的有可能是线性表位也有可能是空间表位，这两个实验往往需要购买和使用多种单克隆抗体。

本发明旨在提供一种既可以靶向结合人的PD-1蛋白也同时能够作为ELISA、Westernblot、免疫组化等应用的PD-1单克隆抗体，大大节约科研的成本和时间。

发明内容

第一方面，本发明提供了一种抗人PD-1的单克隆抗体，所述抗人PD-1的单克隆抗体具有的特异性抗原结合结构域，既可以靶向结合人的PD-1蛋白也可以同时能够用于ELISA、Westernblot、免疫组化等实验。

本发明的示例性抗人PD-1的单克隆抗体列于文中的表1和表2。本发明提供的抗人PD-1的单克隆抗体包括重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR))。表1列出了本发明提供的抗人PD-1的单克隆抗体的HCVR、LCVR的氨基酸序列，及其在序列表中的序列号。表2列出了编码本发明所述的HCVR、LCVR氨基酸序列对应的核苷酸序列，及其在序列表中的序列号。

本发明提供的抗人PD-1的单克隆抗体的氨基酸序列包括：至少一条HCVR氨基酸序列、至少一条LCVR氨基酸序列；具体HCVR和LCVR优选为任一选自表1的氨基酸序列。

编码本发明提供的抗人PD-1的单克隆抗体的核苷酸序列包括：至少一条HCVR核苷酸序列、至少一条LCVR核苷酸序列；具体HCVR和LCVR优选为任一选自表2的核苷酸序列。

表1 序列表中的氨基酸序列

在本发明一实施例中，抗人PD-1的单克隆抗体2D1-1是经过筛选出的最佳效果的抗人PD-1的单克隆抗体。

在本发明一些实施例中，表1各序列具体为：