[发明专利]一种没食子酰芍药苷单体的制备方法

说明书

本发明一种没食子酰芍药苷单体的制备方法，包括下述步骤：A提取：将赤芍干燥根粉碎成粗粉，以乙醇回流提取得浓浸膏；B萃取：浓浸膏以乙酸乙酯萃取得没食子酰芍药苷粗品；C制备：经纳米有机膜过滤、C18制备、乙酸乙酯萃取得到纯度≥98%的没食子酰芍药苷单体产品。该方法快速简便、成本低廉、可适用于产业化生产且得到的没食子酰芍药苷单体纯度高、性质稳定的没食子酰芍药苷单体的制备方法。

技术领域

本发明涉及一种中药活性成分的分离纯化方法，具体涉及从赤芍干燥根中提取分离没食子酰芍药苷的方法，属于中药分离纯化技术领域。

背景技术

没食子酰芍药苷英文名Galloylpaeoniflorin，CAS：122965-41-7，分子式为C₃₀H₃₂O₁₅，分子量为632.57，结构式如下：

。

最近研究报告指出，赤芍提取物对中枢脑神经内钙离子浓度有影响。赤芍临床上应用在精神抑郁症、抗肿瘤、免疫调节、保护血管、护肝等，这些与传统中医理论所说的健脾补正气、增强免疫力相符合。而国外学者用赤芍的萃取物做的药理活性试验,发现赤芍具有中枢脑神经、免疫、通经、抗动脉粥样硬化、抗肿瘤的作用。

没食子酰芍药苷是赤芍中所具有的一类重要活性化合物，是赤芍的特征性成分。该化合物具有抑制花生四烯酸（arachidonic acid AA）生成酶的功能。在体外研究中发现，没食子酰芍药苷以剂量依赖性和时间依赖性的模式降低细胞增生率，并且诱导细胞发生凋亡。没食子酰芍药苷通过抑制线粒体功能，进而启动凋亡信号，最终细胞发生凋亡。因此，从原植物中提取分离高纯度没食子酰芍药苷，对药材质量控制指标、阐明其药理作用以及为新药开发寻找先导化合物具有重要的意义。

公开号为CN104072550A的申请中公开了中药组合物植物药中间体中单萜及皂苷类成分的分离方法：依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取、大孔吸附树脂纯化得到30%及70%乙醇洗脱部位、取30%乙醇洗脱部位分离得到白芍苷R1纯品、芍药苷纯品、取70%乙醇洗脱部位分离得到芍药苷内酯纯品、芍药酮苷纯品、苯甲酰芍药苷纯品、没食子酰芍药苷纯品、甲基芍药苷纯品、人参皂苷Rg1纯品、人参皂苷Rc纯品、人参皂苷Rb1纯品、人参皂苷Rb2纯品等。该方法虽然能得到没食子酰芍药苷纯品，但是其没食子酰芍药苷纯品的纯度低，用其工艺是不能得到HPLC纯度达98.5%以上的单体。

公开号为 CN1799581，丹皮有效组分及制备方法，其活性成分的百分含量为芍药苷10～25%，没食子酰芍药苷40～55%，牡丹皮苷30～45%；制备方法是将丹皮药材粉碎后加热提取，将提取液浓缩成浸膏，与硅胶进行拌样，用正相硅胶柱对其进行分离，将洗脱液浓缩干燥后得样品，用制备液相色谱继续分离得到的有效组分。分离纯化没食子酰芍药苷没有针对性，其分离过程复杂，不利于没食子酰芍药苷的稳定。

发明内容

本发明旨在克服现有技术没有一种针对没食子酰芍药苷单体的提取纯化工艺，且现有方法分离得到的没食子酰芍药苷单体纯度低，性质不稳定的的缺陷，提供一种快速简便、成本低廉、可适用于产业化生产且得到的没食子酰芍药苷单体纯度高、性质稳定的没食子酰芍药苷单体的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明通过以下技术方案实现：

一种没食子酰芍药苷单体的制备方法，包括下述步骤：

A、提取：

将赤芍干燥根粉碎成粗粉，加入质量百分比浓度为65%～75%的乙醇溶液，回流提取，提取液过滤，除去乙醇，得在45℃～50℃下相对密度为1.30-1.40的浓浸膏；

B、萃取：

将步骤A所得的浓浸膏先加入水进行分散，得分散溶液，然后加入石油醚萃取，除去石油醚萃取液，水相加入乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯萃取液，浓缩至干，得食子酰芍药苷粗品；