[发明专利]岩黄连愈伤组织高效诱导方法在审
| 申请号： | 201611264732.7 | 申请日： | 2016-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN106718923A | 公开（公告）日： | 2017-05-31 |
| 发明（设计）人： | 李翠;张占江;王一诺;韦莹;郭晓云;韦坤华;李林轩 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区药用植物园 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙)11369 | 代理人： | 靳浩 |
| 地址： | 530023 广西*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 黄连 组织 高效 诱导 方法 | ||
1.一种岩黄连愈伤组织高效诱导方法，其特征在于，取岩黄连外植体经洗净消毒后接种至诱导培养基中诱导培养10-15天得到愈伤组织，所述诱导培养基是以B5培养基为基本培养基，还加入6-苄基腺嘌呤0.5-1.5mg/L、2,4-二氯苯氧乙酸0.5-1.5mg/L、维生素C 5-20mg/L、活性炭0.1-0.3g/L、蔗糖20-30g/L以及琼脂3.8-4.5g/L，所述诱导培养基的pH值为6.0。
2.如权利要求1所述的岩黄连愈伤组织高效诱导方法，其特征在于，将所述愈伤组织接种至增殖培养基中进行增殖培养，所述增殖培养基是以B5培养基为基本培养基，还添加6-苄基腺嘌呤0.1-1.0mg/L、2,4-二氯苯氧乙酸0.2-1.0mg/L、维生素C5-20mg/L、活性炭0.1-0.3g/L、蔗糖20-30g/L以及琼脂3.8-4.5g/L，所述增殖培养基的pH值为5.8。
3.如权利要求1所述的岩黄连愈伤组织高效诱导方法，其特征在于，所述诱导培养的具体步骤为：将消毒后的所述岩黄连外植体放于温度为23-26℃下，先暗培养1周后，再置于的光照时间为10-12h/d，光照强度1400-2000lux的条件下培养3-8天。
4.如权利要求2所述的岩黄连愈伤组织高效诱导方法，其特征在于，所述增殖培养的条件为：培养温度25±2℃，光照强度1400-2000lux，光照强度为10-12h/d。
5.如权利要求1所述的岩黄连愈伤组织高效诱导方法，其特征在于，所述岩黄连外植体洗净消毒方法为：取岩黄连外植体依次用2％清洗剂水溶液浸泡5-10min、线状自来水冲洗5-15min、质量浓度为75％乙醇表面消毒30-45s、质量浓度为0.1％HgCl2消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸吸去表面水分，备用。
6.如权利要求1所述的岩黄连愈伤组织高效诱导方法，其特征在于，所述岩黄连外植体为叶片、叶柄，茎中的一种。
7.如权利要求1所述的岩黄连愈伤组织高效诱导方法，其特征在于，所述诱导培养基中还加入有水杨酸0.59-0.88mg/L、茉莉酸甲酯0.42-0.79mg/L、精氨酸0.4-1g/L、L-半胱氨酸0.2-0.8g/L以及赖氨酸0.1-0.6g/L。
8.如权利要求2所述的岩黄连愈伤组织高效诱导方法，其特征在于，所述增殖培养基中还加入油菜素内酯0.04-0.08mg/L、硼氢化钾7-12mg/L、硫酸亚铁3-6mg/L以及叶酸0.4-0.8mg/L。
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