[发明专利]一种利用微生物发酵生产DHA的方法

权利要求书

1.一种培养用于生产DHA的微生物的方法，其中：

从发酵罐培养的36－60小时开始，将溶解氧饱和度控制在5％－10％；和

从发酵罐培养的36－60小时开始，不再加入氮源或者将氮源的加入量减少50％以上；

其中，

所述发酵罐培养还包括在发酵罐培养起始的12－36小时，进行分罐培养的步骤；并且

所述用于生产DHA的微生物为裂殖壶菌。

2.根据权利要求1所述的培养方法，其中：

从发酵罐培养的40－56小时开始，将溶解氧控制在5％－10％，和/或

从发酵罐培养的40－56小时开始，不再加入氮源。

3.根据权利要求1所述的培养方法，其中：

从发酵罐培养的44－52小时开始，将溶解氧控制在5％－10％。

4.根据权利要求1所述的培养方法，其中：

从发酵罐培养的46－50小时开始，将溶解氧控制在5％－10％。

5.根据权利要求1所述的培养方法，其中：

从发酵罐培养的48小时开始，将溶解氧控制在5％－10％。

6.根据权利要求1所述的培养方法，其中：

从发酵罐培养的44－52小时开始，不再加入氮源。

7.根据权利要求1所述的培养方法，其中：

从发酵罐培养的46－50小时开始，不再加入氮源。

8.根据权利要求1所述的培养方法，其中：

从发酵罐培养的48小时开始，不再加入氮源。

9.根据权利要求1所述的培养方法，其中，在控制溶解氧饱和度为5％－10％之前，溶解氧饱和度为30％－50％。

10.根据权利要求1所述的培养方法，其中，发酵液的pH为6.0－7.0。

11.根据权利要求10所述的培养方法，其中，发酵液中葡萄糖的浓度保持1－5g/L。

12.根据权利要求1所述的培养方法，其中，所述氮源为氨水。

13.根据权利要求12所述的培养方法，其中，所述氨水为25％－45％的氨水。

14.根据权利要求12所述的培养方法，其中，所述氨水为35％－45％的氨水。

15.根据权利要求12所述的培养方法，其中，所述氨水为40％的氨水。

16.根据权利要求1所述的培养方法，其中，所述发酵罐培养还包括在发酵罐培养起始的24小时，进行分罐培养的步骤。

17.根据权利要求1所述的培养方法，其中，所述分罐培养是分为两个或更多个发酵罐进行发酵罐培养。

18.根据权利要求1所述的培养方法，其在发酵罐培养之前，还包括接种和种子扩大培养的步骤。

19.根据权利要求18所述的培养方法，其中，所述种子扩大培养包括一级种子扩大培养和二级种子扩大培养。

20.根据权利要求19所述的培养方法，其中，所述一级种子扩大培养包括下述步骤：

按照0.4％－1％的接种量将摇瓶种子液接入装有灭菌后培养基的一级种子罐中，培养温度25℃－32℃，通气量1－2vvm，罐压0.02－0.05MPa，搅拌转速50－100rpm，培养30－35h，完成一级种子扩大培养。