[发明专利]一种利用微生物发酵生产DHA的方法

说明书

本发明属于发酵工程领域，涉及一种利用微生物发酵生产DHA的方法，具体地，涉及利用裂殖壶菌菌株工业化发酵生产含二十二碳六稀酸(DHA)混合油脂的方法。更具体地，本发明涉及一种培养用于生产DHA的微生物的方法，其中：从发酵罐培养的36－60小时开始，将溶解氧饱和度控制在5％－10％，和/或从发酵罐培养的36－60小时开始，不再加入氮源。本发明的方法制备DHA，产量高，纯度高，并且有利于DHA的大规模工业化生产。

技术领域

本发明属于发酵工程领域，涉及一种利用微生物发酵生产DHA的方法，具体地，涉及利用裂殖壶菌菌株工业化发酵生产含二十二碳六稀酸(DHA)混合油脂的方法。

背景技术

DHA，全名二十二碳六烯酸(cis-4,7,10,13,16,19-docosahexaenoic acid,DHA)，是一种多元不饱和脂肪酸。人体自身难以合成，必须从外界摄取。DHA属于人体必需脂肪酸之一，有重要的生理调节功能和保健作用，缺乏时会引发一系列病症，包括生长发育迟缓、皮肤异常、鳞屑、不育、智力障碍等，另外还对心血管疾病有特殊的预防和治疗效果。有关研究还表明，DHA能作用于许多不同类型的组织和细胞，具有抑制炎症及免疫作用，包括减少炎症因子的产生、抑制淋巴细胞增殖等，DHA还具有预防老年痴呆、神经性疾病等多重功效。

目前DHA的商业来源主要是鱼油和微藻。传统深海鱼油提取的DHA受鱼的品种、季节及地理位置的影响而不稳定，且胆固醇和其他不饱和脂肪酸含量高，脂肪酸链的长度和不饱和度差异均较大，导致DHA产量有限、含量不高、分离纯化困难，成本较高等问题。随着鱼油原料来源日渐紧缺，难以实现DHA这种高附加值产品在食品和医药等行业中的广泛应用。微生物发酵法生产DHA可克服传统鱼油提取的缺陷，可用于大量生产DHA，不断满足人们的需求，具有广阔的应用前景，备受国内外学者关注。微生物发酵法采用真菌及微藻等产油微生物发酵生产含DHA藻油，经精制提取得DHA含量高的精油。国家卫生部许可的DHA生产菌种包括裂殖壶菌(Schizochytrium sp.)、吾肯氏壶藻(Ulkenia amoeboida)和寇氏隐甲藻(Crypthecodinium cohnii)。

微生物发酵法生产DHA的市场份额在逐年快速上升，有取代鱼油DHA的趋势，提高微藻DHA生产技术及品质，进军微藻DHA市场前景广阔。

公开号为CN103882072A的专利公开了一种利用裂殖壶菌生产二十二碳六烯酸的方法，其所公开的最高产量为细胞干重61.2g/L、DHA含量55.07％、DHA产量22.17g/L。公开号为CN101812484A的专利公开了一种高密度培养裂殖壶菌发酵生产DHA的方法，其所公开的产量为细胞干重120－150g/L、DHA产量26－30g/L，这也是目前报道的采用裂殖壶菌(Schizochytrium sp.)生产DHA的最高生产水平。虽然其DHA生产率较之前的研究有了较大提高，但对于利用微藻进行工业化生产二十二碳六烯酸，大大降低其生产成本，提高单位产量，使微生物发酵产DHA的方法能够得到大力推广和普及使用还是远远不够的。