[发明专利]表达α‑1抗胰蛋白酶（AAT）的遗传修饰的间充质干细胞

说明书

技术领域

本发明涉及用作药物的遗传修饰的间充质干细胞，所述药物治疗没有α-1抗胰蛋白酶(AAT)缺乏症的受试者的与炎症和/或不想要的免疫应答相关的医学病症，其中所述干细胞包含外源核酸，所述外源核酸包含可操作地连接于(ii)启动子或启动子/增强子组合的(i)α-1抗胰蛋白酶(AAT)编码区。

背景技术

间充质干细胞(MSC)是存在于骨髓和其他组织中的非造血来源的细胞。MSC一般被认为是多能成体祖细胞，其具有分化为有限数目的细胞谱系如成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞的能力。基于这种直接分化为这些末期表型的能力，已经对MSC作为治疗实体的用途进行了研究，包括MSC促进或提高骨修复和用于修复软骨缺损的用途(Vilquin和Rosset,再生医学(Regenerative Medicine)2006:1,4,p 589以及Veronesi等人,干细胞和发育(Stem Cells and Development)2013；22,p 181)。已经描述了用于许多治疗性适应症的MSC的分离和培养，并且这代表了针对治疗炎症相关障碍的有前途的方法(例如WO 2010/119039)。

已知MSC展示了施用于患者后的免疫逃逸特性。已经显示MSC展示了在移植同种异体供体材料情况下有利的免疫调节作用(Le Blanc等人,Lancet 2004:363,p 1439)，从而减少了潜在致病的同种异体反应性和排斥。此外，已知MSC显示了抗肿瘤发生的作用，例如抗卡波西肉瘤(Khakoo等人,J Exp Med 2006:203,p 1235)。MSC治疗还可以在创伤愈合中起治疗作用。可以经由全身注射进行MSC的治疗递送，然后MSC归巢并移入损伤的部位(Kidd等人,干细胞(Stem Cells)2009:27,p 2614)。虽然MSC对受伤的组织具有再生作用是明显的，但是它们作为感兴趣的治疗性转基因蛋白的递送载体的用途尚未被充分地探索。

炎性疾病和与不想要的免疫应答有关的疾病代表了世界上健康问题和死亡率的重要原因。例如，炎性疾病(如肺部疾病或自身免疫性疾病)代表了需要改善炎症调节以提供有效治疗的医学病症。

肺部疾病(如呼吸系统疾病)可能严重影响患者的健康，并且涵盖影响肺的器官和组织的许多病理状况。作为肺部疾病的一个例子，呼吸系统疾病包括上呼吸道、气管、支气管、细支气管、肺泡、胸膜和胸膜腔以及呼吸的神经和肌肉的病症。呼吸系统疾病是全球死亡的主要原因之一。肺部感染(如肺炎和肺结核)、肺癌和慢性阻塞性肺疾病(COPD)在2008年期间在世界上一共造成950万人死亡，占全球死亡总数的六分之一。根据世界卫生组织，四种呼吸系统疾病类别出现在全球十大死因之中，它们共占死亡人数的六分之一，以及损失的伤残调整生命年(disability-adjusted life-years)的十分之一。在欧盟的28个国家中，这些疾病占死亡人数的八分之一。为了减少炎症，治疗通常涉及抗炎药物(如皮质类固醇)的使用。鉴于肺部疾病的流行，需要新的治疗策略。

自身免疫疾病是与个体对抗其身体的细胞、物质或组织的免疫应答相关的医学病症。一般人群中很少数人患有可能是急性或慢性的自身免疫性疾病，并且往往在长时间内衰弱。在自身免疫性疾病和炎性疾病两者中，例如针对身体自身组织或蛋白质的自身免疫性疾病中，医学病症通常通过人类适应性免疫系统和/或固有免疫系统的反应产生。

具有重要意义的自身免疫性疾病的一个例子是1型糖尿病。1型糖尿病占所有糖尿病病例的5％至10％。全球每年约有80000名青年被诊断出患有1型糖尿病，据估计在美国共有300万人患有1型糖尿病(Chiang等人,糖尿病护理(Diabetes Care)2014:37,pp 2034-55)。在患有1型糖尿病的患者中，胰腺β-细胞被β-细胞自身抗原、巨噬细胞、树突状细胞、B淋巴细胞和T细胞淋巴细胞参与的自身免疫反应破坏。由于这些患者缺乏胰腺β细胞，所以胰岛素的产生减少，导致血液和尿液中的葡萄糖水平升高。目前的治疗方法通常依赖于调节胰岛素水平，而不直接解决潜在的免疫系统病理学。

具有重要意义的炎性疾病的一个例子是关节炎，例如痛风(痛风性关节炎)。痛风是一种医学病症，其特征通常是在特定位置的复发性急性炎症性关节炎，其导致肿胀和关节疼痛。大脚趾底部的跖趾关节是通常受影响的区域。痛风通常被公认是由血液中尿酸水平升高所引起，导致尿酸结晶，晶体沉积在患者体内的关节、肌腱和周围组织中。治疗通常涉及抗炎药的使用，例如非类固醇抗炎药(NSAID)或皮质类固醇，或阻止尿酸产生的药物。