[发明专利]经修饰的血凝块

说明书

技术领域

本发明涉及组织愈合与止血领域。更具体地，本发明描述了经修饰的血凝块，及它们作为治疗剂和作为细胞和生物分子的递送载体的用途。

背景技术

下面列出了被认为与目前披露的主题相关的作为背景的文献：

1.Gale AJ.Current Understanding of Hemostasis.Toxicologic pathology.2011；39(1)：273-280；

2.Mosesson MW.Fibrinogen and fibrin structure and functions.J Thromb Haemost.2005 Aug；3(8)：1894-904；

3.Dickneite G，Metzner H，Pfeifer T，Kroez M，Witzke G.A comparison of fibrin sealants in relation to their in vitro and in vivo properties.Thromb Res.2003；112(1-2)：73-82；

4.WO1993005822；

5.US7125569；

6.WO2015128858；

7.Blair P，Flaumenhaft R.Platelet α-granules：Basic biology and clinical correlates.Blood reviews.2009；23(4)：177-189；

8.Dohan Ehrenfest DM，Rasmusson L，Albrektsson T.Classification of platelet concentrates：from pure platelet-rich plasma(P-PRP)to leucocyte-and platelet-rich fibrin (L-PRF).Trends Biotechnol.2009 Mar；27(3)：158-67；

9.WO2010100570；

10.Li PS et al A novel albumin-based tissue scaffold for autogenic tissue engineering applications Sci.Rep.2014 Jul 18；4：5600。

这里对上述文献的认知并不意味着这些文献与目前所披露的主题的可专利性有任何关系。

止血是一种在阻止伤口部位出血的同时，维持血液循环中其他位置的正常血流的生理过程。血液流失通过止血栓的形成而被阻止(综述于Gale AJ中)。

止血过程包括血小板聚集、血小板血栓形成和通过蛋白水解的凝血级联产生的不溶性纤维蛋白沉积。该不溶性纤维蛋白形成被并入血小板血栓中和围绕血小板血栓的网状物。该网状物用来加固和稳定血凝块。

已生产了多种类型的血凝块替代产品，例如纤维蛋白密封剂，也称为“纤维蛋白胶”(参见例如Dickneite G et al)。

纤维蛋白密封剂由涉及纤维蛋白原、凝血酶和因子XIII的酶促反应形成。凝血酶通过酶促反应，以由凝血酶浓度确定的速率将纤维蛋白原转化为纤维蛋白。因子XIII是凝血系统的酶，它使纤维蛋白凝块交联并稳定。纤维蛋白制剂可进一步包括抗蛋白水解剂(如WO1993005822中所述)。可除去纤溶酶原以阻止或延缓纤维蛋白溶解(参见例如US7125569)。

纤维蛋白原部分的制备过程可引起一些血浆蛋白从纤维蛋白原组合物中部分或完全去除。WO2015128858公开了用血浆补充浓缩的纤维蛋白原制剂，以使纤维蛋白原制剂更稳定。

另一种类型的血液制品是血小板浓缩物(综述于Dohan Ehrenfest DM et al中)。典型地，这类制剂是在未活化状态下注入修复部位的存活血小板的浓缩物。有时向浓缩物溶液中加入活化剂，如氯化钙或葡萄糖酸钙。或者，将该浓缩物溶液加入支架中，如胶原支架，这可引起浓缩物溶液中血小板的一些活化。

发明内容

本文描述的方法和组合物部分涉及令人惊讶的发现，即血凝块(其通常作为生物废物被丢弃)可以经修饰，例如通过去除包括在凝块中的存活细胞来修饰，并施用于患者以便增强治疗过程，例如组织再生和止血。从组合物中去除凝块的细胞成分，如血小板(凝血细胞)、白细球(WBC，白血胞)和红细胞(RBC，红血球)，从而获得具有组织再生特性的可重复使用的凝块。