[发明专利]核酸的分离有效

专利信息
申请号: 201680028490.3 申请日: 2016-03-17
公开(公告)号: CN107743521B 公开(公告)日: 2021-01-08
发明(设计)人: 斯蒂芬·约翰·敏特;乔尔乔斯·派特索斯 申请(专利权)人: 雷沃卢金有限公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10;C12Q1/6806
代理公司: 中科专利商标代理有限责任公司 11021 代理人: 柳春琦
地址: 英国*** 国省代码: 暂无信息
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要:
搜索关键词: 核酸 分离
【权利要求书】:

1.从生物材料分离包含DNA的核酸的方法,所述方法包括下述步骤:

(i)用水溶液实施所述生物材料的裂解,以产生水性的裂解的组合物,所述水溶液包含浓度为0.05-1.0M的锂盐、螯合剂和表面活性剂,

(ii)在存在浓度为0.05-2M的溶解的离液剂和25体积%-60体积%的溶解的C1-3链烷醇液体的条件下,用固体载体处理所述裂解的组合物,所述固体载体能够固定DNA,

(iii)将所述固体载体与液体分离,

(iv)用包含浓度为0.05-1M的锂盐的第一洗涤溶液处理所述固体载体,所述第一洗涤溶液包含20体积%-90体积%的溶解的C1-3链烷醇,

(v)将所述固体载体与所述第一洗涤液分离,

(vi)用第二洗涤液处理所述固体载体,所述第二洗涤液包含至少80体积%的C1-3链烷醇,如果存在余量的话,余量为水,

(vii)将所述固体载体与所述第二洗涤溶液分离,和

(viii)从所述固体载体上洗脱DNA。

2.权利要求1所述的方法,其中,在包含浓度为0.05-1.0M的锂盐、螯合剂和表面活性剂的所述水溶液中,所述锂盐的浓度小于1.0M。

3.权利要求2所述的方法,其中,在包含浓度为0.05-1.0M的锂盐、螯合剂和表面活性剂的所述水溶液中,所述锂盐的浓度为0.2-0.9M。

4.权利要求2所述的方法,其中,在包含浓度为0.05-1.0M的锂盐、螯合剂和表面活性剂的所述水溶液中,所述锂盐的浓度为0.2-0.8M。

5.权利要求1所述的方法,其中步骤(i)所述的水溶液基本上由下述组成:水,浓度为0.7-0.9M的氯化锂,浓度为5-15mM的EDTA或其钠盐和0.9-1.1重量%的SDS。

6.权利要求5所述的方法,其中在步骤(ii)中,所述离液剂是浓度为0.6-0.7M的胍氯化物,并且所述链烷醇是以所述液体的35-40体积%的量存在的乙醇。

7.权利要求1所述的方法,其中步骤(i)所述的水溶液基本上由下述组成:水,浓度为0.2-0.3M的氯化锂,浓度为1-5mM的EDTA或其钠盐,浓度为0.6-0.7M的胍氯化物,量为0.2-0.4重量%的SDS和35-40体积%的乙醇。

8.权利要求1-7中任一项所述的方法,其中所述第一洗涤液基本上由下述组成:水,浓度为0.3-0.6M的氯化锂和45体积%-55体积%的乙醇。

9.权利要求1-7中任一项所述的方法,其中所述第一洗涤液基本上由下述组成:水,浓度为0.6-1M的氯化锂和45体积%-55体积%的乙醇。

10.权利要求1-7中任一项所述的方法,其中所述第二洗涤液基本上由80体积%-95体积%的乙醇和水组成。

11.权利要求1-7中任一项所述的方法,其中所述固体载体包含二氧化硅。

12.权利要求1-7中任一项所述的方法,其中步骤(iii)在离心管中实施,在所述离心管中,所述固体载体是过滤器,并且步骤(iii)、(v)、(vii)和(viii)通过离心实施。

13.权利要求12所述的方法,其中所述过滤器包括硼硅酸盐玻璃纤维。

14.权利要求13所述的方法,其中在所述离心管中提供多个所述过滤器。

15.权利要求14所述的方法,其中提供四个过滤器。

下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于雷沃卢金有限公司,未经雷沃卢金有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201680028490.3/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。

×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top