[发明专利]评估对象药物的血液毒性评估方法和评估对象药物的血液毒性评估用模型

说明书

技术领域

本发明涉及一种评估对象药物的血液毒性评估方法、以及评估对象药物的血液毒性评估用模型。

背景技术

因脊髓病变而出现的白细胞减少等血液毒性是抗癌药的主要副作用(参照非专利文献1)，在多种抗癌药中成为给药量制约因素(DLF)。在药物开发的研究阶段，通过使用实验动物的外周血的血液学检查进行血液毒性评估。然而，在上述使用实验动物的抗癌药的血液毒性评估实验中，上述脊髓病变的程度在上述实验动物和人中有时会不同，缺少临床预见性。特别是，在使用啮齿类的实验中，反应性及上述脊髓病变的恢复期间与上述人的临床所见不同。作为该差异的要因，可以列举：主要是在上述人和上述实验动物中骨髓细胞对上述抗癌药的敏感性及细胞增殖时间不同等。另外，为了研究上述抗癌药对造血系细胞的分化增殖能力的影响，有时还进行集落形成试验及ATP测定，但在这些体外实验中，上述抗癌药通过在体内代谢而表现出效果时，除了难以进行评估以外，也难以对恢复性的变化进行研究。

在迄今为止的动物实验中，关于引起上述脊髓病变的骨髓毒性的临床预见性低，难以由上述动物实验中的给药量推测上述人临床上的给药量。因此，迄今为止尚未报道骨髓毒性的临床预见性高的评估方法。

另外，有人报道了一种小鼠，是对作为重度免疫功能不全小鼠的NOG小鼠(参照专利文献1和非专利文献2)全身照射X射线以破坏其骨髓，之后移植来自人脐带血的CD34⁺细胞而获得的小鼠(参照非专利文献3)。

另外，有人报道了：在对上述NOG小鼠全身照射X射线以破坏其骨髓、之后移植了来自人脐带血的CD34⁺细胞的小鼠和移植了来自C57BL/6J小鼠骨髓的谱系细胞的小鼠中，评估了苯的血液毒性(参照非专利文献4和非专利文献5)。

然而，在人源化的上述NOG小鼠中，虽然在来自所有组织的血细胞中确认到了人白细胞系前驱细胞和人白细胞系成熟细胞，但骨髓球系细胞的分化不充分，特别是几乎没有确认到粒细胞的分化。因此，即使在使用NOG小鼠的情况下，也难以进行骨髓毒性的临床预见性高的评估对象药物的血液毒性评估，尚不存在适合于评估对象药物的血液毒性评估的模型动物。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本专利第3753321号公报

非专利文献

非专利文献1：日药理志132,第343～346页(2008)

非专利文献2：Blood 100,第3175～3182页(2002)

非专利文献3：电力中央研究所报告研究报告：V09011,平成22年4月

非专利文献4：电力中央研究所报告研究报告：V11063,平成25年1月

非专利文献5：PLoS One.2012；7(12)：e50448

发明内容

技术问题

本发明的课题在于：解决上述现有的各种问题，达到以下目的。即，本发明的目的在于：提供一种骨髓毒性的临床预见性优异的评估对象药物的血液毒性评估方法、以及评估对象药物的血液毒性评估用模型。

解决问题的方案

为了解决上述目的，本发明人进行了深入研究，结果发现：使用人源化的修饰型NOG小鼠可以对评估对象药物的人血液毒性进行评估，从而完成了本发明。

本发明基于本发明人的上述认知，用于解决上述课题的方法如下。即，

＜1＞一种评估对象药物的血液毒性评估方法，该方法的特征在于，包括如下工序：

对人源化的修饰型NOG小鼠给予评估对象药物，所述人源化的修饰型NOG小鼠是向NOG小鼠中导入人GM－CSF/IL－3基因，且在血液中的白细胞中来自人的白细胞的含量为20个数％以上的小鼠；以及

对于给予了上述评估对象药物后的上述修饰型NOG小鼠的样品测定来自人的血细胞的细胞数，当相比于给予了溶剂以代替上述评估对象药物的对照，上述来自人的血细胞的细胞数发生变化时，评估上述评估对象药物具有血液毒性。

＜2＞上述＜1＞所述的评估对象药物的血液毒性评估方法，其中，上述人源化的修饰型NOG小鼠是通过对修饰型NOG小鼠进行放射线照射以排除来自小鼠的骨髓细胞、并移植来自人的hCD34⁺细胞使其存活而制作的。

＜3＞上述＜1＞～＜2＞中任一项所述的评估对象药物的血液毒性评估方法，其中，对上述人源化的修饰型NOG小鼠的样品给予上述评估对象药物。