[发明专利]用于检测病毒的改善的组合物和方法在审
申请号: | 201680038604.2 | 申请日: | 2016-05-06 |
公开(公告)号: | CN108350511A | 公开(公告)日: | 2018-07-31 |
发明(设计)人: | 陈福和;杨文龙;杜启泓;刘耀南;霍文逊;袁国勇 | 申请(专利权)人: | 新兴病毒诊断(香港)有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6816 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 王永伟;丁秀云 |
地址: | 中国香港干诺道*** | 国省代码: | 中国香港;81 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 冠状病毒 锁核酸 非翻译前导序列 病毒 人类病原体 高度保守 扩增反应 试验提供 准确检测 短序列 拷贝 灵敏 检测 | ||
1.检测病毒的方法,包括;
鉴定在合适的宿主细胞被所述病毒感染时以3%和10%之间表达的高度保守的核苷酸测试序列;
合成与所述测试序列至少部分互补的探针序列;
使所述探针序列与所述测试序列杂交以形成杂交复合体;和
检测所述杂交复合体。
2.权利要求1所述的方法,其中所述核苷酸测试序列的长度在30和200个核苷酸之间。
3.权利要求1所述的方法,其中所述核苷酸测试序列在60和90个核苷酸之间。
4.权利要求1所述的方法,其中所述测试序列代表非翻译区。
5.权利要求1所述的方法,其中所述测试序列在合适的宿主细胞被所述病毒感染时以大于5%被表达。
6.权利要求1所述的方法,其中所述核苷酸测试序列包括位于转录调控序列上游的5’非翻译区的前导序列。
7.权利要求1所述的方法,其中所述探针序列在表1中被鉴定。
8.权利要求1所述的方法,其中所述探针序列包括与所述测试序列互补性的0.5%和10%之间的缺少。
9.权利要求1所述的方法,其中所述探针序列包括非自然存在的核苷酸。
10.权利要求9所述的方法,其中所述非自然存在的核苷酸包括LNA。
11.权利要求1所述的方法,其中所述探针序列包含可检测标签。
12.权利要求11中所述的方法,其中所述可检测标签选自荧光团、发色团、旋转标签、放射性同位素、亲和表位、和质量标签。
13.权利要求1所述的方法,其中所述病毒是RNA病毒。
14.权利要求1所述的方法,其中所述病毒选自冠状病毒、星状病毒科、杯状病毒科、小核糖核酸病毒科、黄病毒科、反转录病毒科、披膜病毒科、沙粒病毒科、布尼亚病毒科、丝状病毒科、正黏病毒科、副黏病毒科、弹状病毒科、和呼肠病毒科。
15.权利要求1所述的方法,其中所述病毒是SARS或MERS的致病因素。
16.权利要求1所述的方法,其中所述病毒是流感病毒。
17.权利要求1所述的方法,其中所述杂交复合体包含多核苷酸双链体。
18.权利要求1所述的方法,其中所述杂交复合体包含多核苷酸三链体。
19.权利要求1所述的方法,其中实施该检测步骤而无外源聚合酶驱动的扩增步骤。
20.权利要求1所述的方法,其中所述检测步骤还包括扩增步骤,其中使用外源聚合酶复制至少部分所述测试序列。
21.权利要求20所述的方法,其中所述扩增步骤包括PCR。
22.权利要求21所述的方法,其中所述扩增步骤包括RT-PCR。
23.权利要求21所述的方法,其中所述扩增步骤包括实时RT-PCR。
24.权利要求21所述的方法,其中所述扩增步骤包括巢式PCR。
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