[发明专利]利用纳米粒子的核酸检测用试剂盒及核酸检测方法

说明书

本发明涉及利用纳米粒子的核酸检测用试剂盒及核酸检测方法，更详细地涉及包括对核酸进行扩增及标记后，利用纳米粒子捕获，来进行离心分离的步骤的核酸检测方法及利用其方法的核酸检测用试剂盒。本发明可通过不包括分离步骤的核酸检测法，能够进一步迅速、简单、敏感、高可靠度地判别与特定疾病相关的阴性、阳性的判断从而有效。

技术领域

本申请主张于2015年07月13日提出的韩国专利申请第10-2015-0099378号及2015年08月27日提出的韩国专利申请第10-2015-0121109号的优先权，上述申请的说明书整体作为本申请的参考文献。

本发明涉及利用纳米粒子的核酸检测用试剂盒及核酸检测方法，更详细地涉及包括对核酸进行扩增及标记后，利用纳米粒子捕获，来进行离心分离的步骤的核酸检测方法及利用其方法的核酸检测用试剂盒。

背景技术

在多领域中超高速核酸检查的必要性逐渐增加。核酸检查最终以通过疾病的早期发现降低总医疗费用的目的来使用，并期待以后用于病原菌检查、基因分型、癌症诊断等的与各种核酸相关的对可用作同时分析、需要、增加和现场检查用的产品的需要急增。为了解决上述问题，需要多进行与基因分型及癌症相关的特异性和敏感度高的脱氧核糖核酸/核糖核酸(DNA/RNA)标记的开发。为了得到广泛利用核酸检查，需要解决的很多问题，但是期待核酸检查支配诊断市场的时代即将到来，这只是时期的问题，为了提前其时期，开发用于低费用的核酸检查的装置和有效的脱氧核糖核酸(DNA)标记成为研究的中心。

核酸检查需要满足分析有效性(analytical validity)，如敏感度、特异性、精密性、准确性等；临床有效性(clinical validity)，如临床敏感度、特异性、阴性预测率(negative predictive value)等；以及有用性(clinical utility)。对核酸检查的对象大致分为两种是来源于感染于人体的微生物的核酸和直接来源于人体的核酸。前者作为诊断是否感染的检查占有检查市场的80％以上。后者为对与疾患的诱发和治疗相关的核酸进行分析的基因检查(genetic test)，市场占有率小于20％，但是展望潜在性价值和市场性非常高。

在各种核酸检测方法中，利用纳米粒子的核酸检测作为可划时代的改善作为利用现有负电荷形态的树脂(带负电荷的聚阴离子(negative charged polyanion))及二氧化硅膜(silica membrane)技术的方法的缺点的低速、高费用方法的下一代技术，竞争性地开发如下系统：制备纳米粒子，并进行可捕获核酸的涂敷处理，来与对象核酸分子选择性地结合，从而检测核酸。作为现有技术，在美国专利US20140100131中作为检测目的基因的方法使用磁性粒子，美国专利US20100009383涉及用于检测生物体分子的方法，可通过利用磁性粒子回收靶物质后，进行离心分离，来检测凝集的靶物质。但是现有的方法存在需要添加脱氧核糖核酸探针或抗体的不便，还需要分离及清洗过程，需要与进一步迅速的核酸检测方法相关的发明。

对此，本发明人通过使用扩增的目标核酸和纳米粒子，来制备凝胶卡，并例证对此进行离心分离后可用肉眼/荧光确认，并确认这种核酸检测方法在检测与特定相关的特定核酸中具有显著的效果。因此，本发明通过不包括分离步骤的核酸检测法，发明了可迅速、简单、敏感、高可靠度地判别与特定疾病相关的阴性、阳性的核酸检测方法及核酸检测用试剂盒。

发明内容

技术问题

本发明提供快速准确检测核酸的试剂盒。

本发明的另一目的在于，提供用于检测核酸的纳米粒子复合物。

本发明的另一目的在于，提供用于检测纳米粒子复合物的凝胶卡。

本发明的还一目的在于，提供快速、准确地检测核酸的方法。

解决问题的方案