[发明专利]新型ENDOS突变型酶有效
申请号: | 201680041901.2 | 申请日: | 2016-07-15 |
公开(公告)号: | CN108026518B | 公开(公告)日: | 2022-09-06 |
发明(设计)人: | 川口喜郎;中村健介;关口幸子;岩本充广 | 申请(专利权)人: | 第一三共株式会社 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N15/02;C12N15/09;C12P21/02;C12P21/08 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 梁谋;罗文锋 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 新型 endos 突变型 | ||
1.一种EndoS突变型酶,其包含SEQ ID NO: 2的氨基酸编号37至995的氨基酸序列且在选自如下的1或2个氨基酸位置具有额外突变:
在H122处突变为Ala (H122A)或Phe (H122F);
在D279处突变为Ser (D279S)或Gln (D279Q);
在Y282处突变为Arg (Y282R);
在Q303处突变为Leu (Q303L);
在Y348处突变为His (Y348H);
在E350处突变为Ala (E350A)、Asn (E350N)、Asp (E350D)或Gln (E350Q);
在Y402处突变为Phe (Y402F);
在D405处突变为Ala (D405A);和
在R406处突变为Gln (R406Q),且
表现出与EndoS D233Q的活性相比降低的水解活性,所述活性是对IgG中的与位置297的Asn连接的N-连接的糖链(N297-连接的糖链)的活性。
2.根据权利要求1所述的EndoS突变型酶,其中所述额外突变包括选自如下的一个氨基酸位置的突变:Q303、E350和D405。
3.根据权利要求1所述的EndoS突变型酶,其中所述额外突变是选自如下的一种:
在H122处突变为Ala (H122A)或Phe (H122F);
在D279处突变为Ser (D279S)或Gln (D279Q);
在Y282处突变为Arg (Y282R);
在Q303处突变为Leu (Q303L);
在Y348处突变为His (Y348H);
在E350处突变为Ala (E350A)、Asn (E350N)、Asp (E350D)或Gln (E350Q);
在Y402处突变为Phe (Y402F);
在D405处突变为Ala (D405A);和
在R406处突变为Gln (R406Q)。
4.根据权利要求3所述的EndoS突变型酶,其包含至少一个选自如下的突变作为额外突变:Q303L、E350A、E350N、E350D、E350Q和D405A。
5.根据权利要求2所述的EndoS突变型酶,其中所述额外突变是Q303L、E350A、E350N、E350D、E350Q、D405A、
H122A/Q303L、H122F/Q303L、D279Q/Q303L、D279S/Q303L、Y282R/Q303L、Q303L/Y348H、Q303L/E350A、Q303L/E350N、Q303L/E350D、Q303L/E350Q、Q303L/Y402F、Q303L/D405A、Q303L/R406Q、
H122A/E350A、H122F/E350A、D279Q/E350A、D279S/E350A、Y282R/E350A、Y348H/E350A、E350A/Y402F、E350A/D405A、E350A/R406Q、
H122A/E350N、H122F/E350N、D279Q/E350N、D279S/E350N、Y282R/E350N、Y348H/E350N、E350N/Y402F、E350N/D405A、E350N/R406Q、
H122A/E350D、H122F/E350D、D279Q/E350D、D279S/E350D、Y282R/E350D、Y348H/E350D、E350D/Y402F、E350D/D405A、E350D/R406Q、
H122A/E350Q、H122F/E350Q、D279Q/E350Q、D279S/E350Q、Y282R/E350Q、E350Q/Y348H、E350Q/Y402F、E350Q/D405A、E350Q/R406Q、
H122A/D405A、H122F/D405A、D279Q/D405A、D279S/D405A、Y282R/D405A、Y348H/D405A、Y402F/D405A或D405A/R406Q。
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