[发明专利]NT细胞的贮存方法和存储系统在审
申请号: | 201680042142.1 | 申请日: | 2016-07-18 |
公开(公告)号: | CN108026544A | 公开(公告)日: | 2018-05-11 |
发明(设计)人: | 车光烈;李东律;郑永基;宋知焕;严辰姬 | 申请(专利权)人: | 医疗法人圣光医疗财团;车比奥泰有限公司 |
主分类号: | C12N15/87 | 分类号: | C12N15/87;C12N5/073 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 张文辉 |
地址: | 韩国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | nt 细胞 贮存 方法 存储系统 | ||
1.贮存免疫相容性核转移(NT)细胞衍生的干细胞的方法,所述方法包括:
a)在多个供体组织中筛选纯合性;
b)从纯合细胞中分离核以产生NT细胞;
c)从所述NT细胞产生干细胞;并且
d)冷冻保存所述干细胞。
2.权利要求1的方法,其中在筛选的步骤a)中,筛选人白细胞抗原(HLA)-A、HLA-B、和HLA-DR基因纯合的细胞。
3.权利要求1的方法,其中产生NT细胞的步骤b)包括:
将卵母细胞去核;
将体细胞的核与去核的卵母细胞融合;并且
在活化后培养基中培养融合的卵母细胞。
4.权利要求3的方法,其中在含有蛋白质磷酸酶抑制剂的培养基中进行所述卵母细胞的去核。
5.权利要求3的方法,其中在含有仙台病毒或仙台病毒提取物的培养基中进行所述体细胞的核的融合。
6.权利要求3的方法,其中所述活化后培养基包含组蛋白脱乙酰酶抑制剂。
7.权利要求3的方法,其中所述活化后培养基包含表观遗传修饰剂。
8.权利要求7的方法,其中所述表观遗传修饰剂涉及选自由以下组成的组中的至少一种:组蛋白乙酰基转移酶(HAT)蛋白、组蛋白脱乙酰酶(HDAC)蛋白、赖氨酸二甲基化酶(KDM)域蛋白、和蛋白质甲基转移酶(PMT)域蛋白。
9.权利要求1的方法,其中产生所述干细胞的步骤c)包括:
活化所述NT细胞并且产生胚泡;
从产生的胚泡分离内细胞团(ICM)细胞;并且
将分离的ICM细胞进一步培养成所述干细胞。
10.产生免疫相容性核转移(NT)细胞衍生的干细胞的方法,所述方法包括:
a)在多个供体组织中筛选纯合性;
b)从纯合细胞分离核以产生NT细胞;并且
c)从所述NT细胞产生干细胞。
11.权利要求10的方法,其中在步骤a)的筛选中,筛选人白细胞抗原(HLA)-A、HLA-B、和HLA-DR基因纯合的细胞。
12.权利要求10的方法,其中产生所述NT细胞的步骤b)包括:
将卵母细胞去核;
将体细胞的核与去核的卵母细胞融合;并且
在活化后培养基中培养融合的卵母细胞。
13.权利要求12的方法,其中在含有蛋白质磷酸酶抑制剂的培养基中进行所述卵母细胞的去核。
14.权利要求12的方法,其中在含有仙台病毒或仙台病毒提取物的培养基中进行所述体细胞的核的融合。
15.权利要求12的方法,其中所述活化后培养基包含曲古抑菌素A(TSA)。
16.权利要求12的方法,其中所述活化后培养基包含组蛋白脱乙酰酶抑制剂。
17.权利要求13的方法,其中所述表观遗传修饰剂涉及选自由以下组成的组中的至少一种:组蛋白乙酰基转移酶(HAT)蛋白、组蛋白脱乙酰酶(HDAC)蛋白、赖氨酸二甲基化酶(KDM)域蛋白、和蛋白质甲基转移酶(PMT)域蛋白。
18.从免疫相容性NT细胞衍生的干细胞产生分化细胞的方法,所述方法包括:
a)在多个供体组织中筛选纯合性;
b)从纯合细胞分离核以产生NT细胞;
c)从所述NT细胞产生干细胞;并且
d)从所述干细胞产生用于移植的所述分化细胞。
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