[发明专利]抗体样蛋白质的纯化方法

权利要求书

1.一种抗体样蛋白质的纯化方法，其包含下述(a)～(b)的工序：

(a)使抗体样蛋白质与含有固定化于载体的配体的亲和分离基质接触，从而使抗体样蛋白质吸附于亲和分离基质的工序；和

(b)使pH3.5以上的洗脱液与亲和分离基质接触，将抗体样蛋白质洗脱的工序；

所述配体含有在序列号1～5所述的来自蛋白A的E、D、A、B或C结构域的氨基酸序列中将Fc结合部位的Gln和/或Lys置换为Ala、Ser和/或Thr而得到的氨基酸序列，并且

所述配体与所述置换前的配体相比，在酸性pH范围内的抗体结合能力降低。

2.根据权利要求1所述的纯化方法，其中，

所述亲和分离基质为在水不溶性基材固定化有配体的载体。

3.根据权利要求1或2所述的纯化方法，其中，

水不溶性基材含有合成高分子或多糖类。

4.根据权利要求3所述的纯化方法，其中，

多糖类为纤维素或琼脂糖。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的纯化方法，其中，

洗脱液为含有选自由乙酸根离子、柠檬酸根离子、甘氨酸、琥珀酸根离子、磷酸根离子和甲酸根离子组成的组中的至少1种阴离子物种的酸性缓冲液。

6.根据权利要求1～5中任一项所述的纯化方法，其中，

洗脱液中的源自宿主的蛋白质和/或免疫球蛋白的抗体样蛋白质的聚集体的含量减少。

7.根据权利要求6所述的纯化方法，其中，

抗体样蛋白质的洗脱利用pH梯度洗脱进行。

8.根据权利要求7所述的纯化方法，其中，

pH梯度洗脱利用pH4～6的洗脱液进行。

9.根据权利要求1～8中任一项所述的纯化方法，其中，

纯化前的抗体样蛋白质为与源自宿主细胞的蛋白质的混合物。

10.根据权利要求1～8中任一项所述的纯化方法，其中，

纯化前的抗体样蛋白质为与抗体样蛋白质的聚集体的混合物。