[发明专利]抗体样蛋白质的纯化方法在审
申请号: | 201680042481.X | 申请日: | 2016-07-21 |
公开(公告)号: | CN107849088A | 公开(公告)日: | 2018-03-27 |
发明(设计)人: | 西八条正克;中野喜之;鸿池史宪;高野昌行;吉田慎一;水口和信 | 申请(专利权)人: | 株式会社钟化 |
主分类号: | C07K1/22 | 分类号: | C07K1/22;B01J20/281;C07K14/31;C07K16/00;C07K17/02;C12N15/09 |
代理公司: | 北京林达刘知识产权代理事务所(普通合伙)11277 | 代理人: | 刘新宇,李茂家 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 抗体 蛋白质 纯化 方法 | ||
1.一种抗体样蛋白质的纯化方法,其包含下述(a)~(b)的工序:
(a)使抗体样蛋白质与含有固定化于载体的配体的亲和分离基质接触,从而使抗体样蛋白质吸附于亲和分离基质的工序;和
(b)使pH3.5以上的洗脱液与亲和分离基质接触,将抗体样蛋白质洗脱的工序;
所述配体含有在序列号1~5所述的来自蛋白A的E、D、A、B或C结构域的氨基酸序列中将Fc结合部位的Gln和/或Lys置换为Ala、Ser和/或Thr而得到的氨基酸序列,并且
所述配体与所述置换前的配体相比,在酸性pH范围内的抗体结合能力降低。
2.根据权利要求1所述的纯化方法,其中,
所述亲和分离基质为在水不溶性基材固定化有配体的载体。
3.根据权利要求1或2所述的纯化方法,其中,
水不溶性基材含有合成高分子或多糖类。
4.根据权利要求3所述的纯化方法,其中,
多糖类为纤维素或琼脂糖。
5.根据权利要求1~4中任一项所述的纯化方法,其中,
洗脱液为含有选自由乙酸根离子、柠檬酸根离子、甘氨酸、琥珀酸根离子、磷酸根离子和甲酸根离子组成的组中的至少1种阴离子物种的酸性缓冲液。
6.根据权利要求1~5中任一项所述的纯化方法,其中,
洗脱液中的源自宿主的蛋白质和/或免疫球蛋白的抗体样蛋白质的聚集体的含量减少。
7.根据权利要求6所述的纯化方法,其中,
抗体样蛋白质的洗脱利用pH梯度洗脱进行。
8.根据权利要求7所述的纯化方法,其中,
pH梯度洗脱利用pH4~6的洗脱液进行。
9.根据权利要求1~8中任一项所述的纯化方法,其中,
纯化前的抗体样蛋白质为与源自宿主细胞的蛋白质的混合物。
10.根据权利要求1~8中任一项所述的纯化方法,其中,
纯化前的抗体样蛋白质为与抗体样蛋白质的聚集体的混合物。
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