[发明专利]癌症治疗靶点的筛选方法

权利要求书

1.一种鉴定癌症治疗的介导免疫抑制的目标基因的体外方法，包括测量未修饰T细胞和已修饰T细胞的活性；所述未修饰T细胞和所述已修饰T细胞各自与来自已照射荷瘤对象的肿瘤微环境接触；所述已修饰T细胞具有被敲低或敲除的候选基因；其中将所述已修饰T细胞与所述未修饰T细胞比较，如果所述活性提高，所述候选基因被鉴定为癌症治疗的介导免疫抑制的目标基因，其中所述活性选自增殖、细胞周期活化、细胞死亡抑制、细胞因子生产和细胞毒性活性。

2.权利要求1的方法，其中所述对象接受了1Gy到20Gy剂量的靶向肿瘤的照射。

3.权利要求1或2的方法，进一步包括测量第二种未修饰T细胞和第二种已修饰T细胞的所述活性，所述第二种已修饰T细胞具有所述被敲低或敲除的候选基因；所述未修饰T细胞和所述已修饰T细胞已经各自与来自未照射荷瘤对象的肿瘤微环境接触；其中所述第二种未修饰T细胞和所述第二种已修饰T细胞中的所述活性是基本上相同的。

4.一种鉴定癌症治疗的介导免疫抑制的目标基因的非治疗性的、非诊断性的体内方法，包括

(i)向具有已照射肿瘤的已照射荷瘤测试对象注射未修饰T细胞和已修饰T细胞；所述已修饰T细胞具有被敲低或敲除的候选基因；

其中所述测试对象是具有一个肿瘤的非人动物，并且所述肿瘤被照射；或

其中所述测试对象是具有两个或两个以上肿瘤的非人动物，并且所述两个或两个以上肿瘤中的至少一个被使用消融剂量照射以诱导远端效应；和

(ii)测量所述测试对象中所述未修饰T细胞和所述已修饰T细胞的活性，其中所述活性是增殖活性或通过已照射的肿瘤的大小降低来测量的抗肿瘤活性；

其中将所述已修饰T细胞与所述未修饰T细胞比较，如果所述活性提高，所述候选基因被鉴定为癌症治疗的介导免疫抑制的目标基因。

5.权利要求4的方法，其中所述已修饰T细胞是参考T细胞，所述参考T细胞是用对照基因遗传修饰的。

6.权利要求5的方法，其中所述对象接受了1Gy到20Gy剂量的靶向肿瘤的照射。

7.权利要求5的方法，进一步包括向未照射测试对象注射第二种未修饰T细胞和第二种已修饰T细胞，所述第二种已修饰T细胞具有所述被敲低或敲除的候选基因；其中在所述未照射测试对象中将所述第二种已修饰T细胞与所述第二种未修饰T细胞比较所述活性是基本上相同的。

8.权利要求4到7的任一项的方法，其中所述活性是通过注射的T细胞的积累来测量的增殖活性。

9.权利要求4到7的任一项的方法，其中所述活性是通过肿瘤细胞死亡或肿瘤大小降低来测量的抗肿瘤活性。

10.权利要求4到7的任一项的方法，其中所述活性是通过测试对象的提高的存活来测量的抗肿瘤活性。

11.权利要求4到7的方法，其中所述测试对象是小鼠。

12.权利要求8的方法，其中所述测试对象是小鼠。

13.权利要求9的方法，其中所述测试对象是小鼠。

14.权利要求10的方法，其中所述测试对象是小鼠。

15.权利要求11的方法，其中所述小鼠是双肿瘤小鼠，其中仅一个肿瘤接受了靶向放射。

16.权利要求12至14任一项的方法，其中所述小鼠是双肿瘤小鼠，其中仅一个肿瘤接受了靶向放射。

17.权利要求1到2、4到7和12至15的任一项的方法，其中所述T细胞是初始T细胞。