[发明专利]胎盘源基质、其制备方法和其用途

说明书

相关专利申请的交叉引用

本申请要求2015年5月29日提交的美国临时申请第62/168,397号的优先权，其全部内容为了全部目的引入本文以作参考。

技术领域

本发明一般性地涉及胎盘源基质、其制备方法和其用途。

背景技术

胞外基质(ECM)对于在培养物中培养许多细胞类型是必需的，并且显示注射到动物疾病模型(例如心脏局部缺血)中的治疗潜力。ECM可通过多种方法从动物组织制备。然而，异种ECM可引起免疫应答或传播异种人畜共患病(xenozoonoses)，限制临床效用。仍存在对用于临床应用例如用于治疗目的以及生物研究的合适的ECM的需要。

发明内容

本发明涉及胎盘源基质，和制备或使用胎盘源基质的方法。

根据本发明的第一方面，提供制备胎盘源基质的方法。所述方法包括(a)去细胞(decellularizing)或失活(devitalizing)至少一块胎盘组织从而产生去细胞的或失活的胎盘组织，和(b)在消化溶液中消化去细胞的或失活的胎盘组织从而产生胎盘源基质。

胎盘源基质可具有碱性pH，例如约8.0以上。制备方法可进一步包括调节胎盘源基质的pH至8.0以上。胎盘源基质可实质上没有(例如，小于约10、0.1、0.01或0.001wt％)胶原酶。胎盘源基质可基本上由去细胞的或失活的胎盘组织和消化溶液组成。胎盘组织可源自哺乳动物，例如人、牛科、猪科、鼠科、绵羊科、马科、犬科、和猫科，优选人。

去细胞或失活步骤可包括用非变性去污剂(non-denaturing detergent)处理胎盘组织。非变性去污剂可选自由以下组成的组：N-月桂酰肌氨酸盐、聚氧乙烯醇、聚氧乙烯异醇(polyoxyethylene isoalcohol)、聚氧乙烯对叔辛基苯酚、聚氧乙烯壬基酚、脂肪酸的聚氧乙烯酯、和聚氧乙烯山梨醇酯。

制备方法可进一步包括与消化同时、在消化前或后均化去细胞的或失活的胎盘组织。消化可包括在消化溶液中均化去细胞的或失活的胎盘组织。可均化去细胞的或失活的胎盘组织10秒至72小时。可将去细胞的或失活的胎盘组织在4℃下均化。制备方法可进一步包括在均化前切割胎盘组织，并且仅均化部分胎盘组织。

在制备方法中，胎盘源基质可为水凝胶，例如热可逆水凝胶(thermoreversible hydrogel)。胎盘源基质可为热可逆水凝胶；并且热可逆水凝胶的溶液至凝胶和/或凝胶至溶液转变温度可为4℃至40℃的温度。胎盘源基质可为热可逆水凝胶；并且热可逆水凝胶可在大约37℃的温度下凝胶化。

在一个实施方案中，制备方法不包括加入除了来自胎盘组织的天然交联以外的其他交联。在另一实施方案中，制备方法不包括加入除了来自胎盘组织的天然载体以外的其他载体。在又一实施方案中，制备方法不包括加入光活性剂(photoactive agent)。在其他实施方案中，制备方法不包括通过非天然存在的键交联去细胞的或失活的胎盘组织和/或胎盘源基质。

制备方法可进一步包括冷冻或冷冻干燥所述胎盘源基质从而产生冷冻的或冷冻干燥的胎盘源基质。

制备方法可进一步包括将胎盘源基质放置在具有预定形状的模具中，其中胎盘源基质在模具中冷冻或冷冻干燥。

制备方法可进一步包括冷冻或冷冻干燥所述胎盘源基质从而产生海绵结构(sponge structure)，并且任选地用水替代剂(water replacing agent)处理海绵结构，其中冷冻的或冷冻干燥的胎盘源基质以湿润状态保存。水替代剂可含有选自由以下组成的组的一种或多种：甘油(甘油USP)(glycerol(glycerin USP))、阿东糖醇(adonitol)、山梨糖醇、核糖醇(ribitol)、半乳糖醇、D-半乳糖、1,3-二羟基丙醇、乙二醇、三甘醇、丙二醇、葡萄糖、蔗糖、甘露糖醇、木糖醇、内消旋-赤藓醇(meso-erythritol)、己二酸、脯氨酸、羟脯氨酸、聚乙二醇、醇(乙醇)(alcohol)、和脂质。海绵结构可含有具有平均直径为1μm至4000μm的孔。海绵结构的平均空隙体积(void volume)可为10％至95％。

制备方法可进一步包括冷冻或冷冻干燥所述胎盘源基质从而产生海绵结构；将海绵结构溶解在溶剂中从而产生胎盘源溶液；和将胎盘源溶液电纺丝(electrospinning)从而产生纳米纤维。

制备方法可进一步包括在负静压下处理胎盘源基质的海绵结构从而增加孔隙率。