[发明专利]用于样品制备尤其是用于质谱分析的方式和方法

权利要求书

1.叔胺在优选用于质谱和/或UV/可见光谱分析的样品制备中作为缓冲剂的用途，其中所述样品包括蛋白质、多肽和/或肽，所述样品制备包括：

(a)蛋白质、多肽和肽的变性；及

(b)化学同位素标记和/或化学交联，

其中所述用途不包括伯胺缓冲剂。

2.根据权利要求1的用途，其中所述叔胺选自：

(a)三甲基铵盐，优选为三甲基碳酸氢铵(TEAB)、三甲基甲酸铵(TEAF)及三甲基乙酸铵(TEAA)；及

(b)包含一个或多个氮的两性离子缓冲物质，所述一个或多个氮是叔胺氮，所述两性离子缓冲物质优选选自：HEPES、MOPS、HEPPS及MES。

3.根据权利要求1或2的用途，其中所述样品制备包括或由以下步骤组成：

(a)任选实施的化学交联；

(b)任选实施的细胞裂解；

(c)蛋白质、多肽和肽的变性；

(d)还原；

(e)烷基化；

(f)蛋白酶解；及

(g)任选实施的化学同位素标记，

条件是：实施根据(a)的化学交联及根据(g)的化学同位素标记的至少之一。

4.用于质谱和/或UV/可见光谱分析的样品制备的方法，所述样品包括蛋白质、多肽和/或肽，所述方法包括或由以下步骤组成：利用包含或由N,N-二烷基卤代烷酰胺组成的烷基化剂使所述蛋白质、多肽和/或肽发生烷基化，其中

(i)每个烷基独立地选自C₁至C₅非分支或分支的烷基；

(ii)烷烃是非分支或分支的C₂至C₅烷烃；及

(iii)卤素选自氯、溴和碘，

其中每个所述烷基和所述卤代烷酰胺均可以独立地被取代，取代基包括OH。

5.用于质谱和/或UV/可见光谱分析的样品制备的方法，所述样品包括蛋白质、多肽和/或肽，所述方法包括或由以下步骤组成，其中所述步骤在相同的缓冲剂中实施，所述缓冲剂是叔胺，优选为在权利要求2中所定义的叔胺：

(a)任选实施的化学交联；

(b)任选实施的细胞裂解，其中步骤(a)和(b)可以任意顺序实施；

(c)蛋白质、多肽和肽的变性；

(d)还原；

(e)烷基化；

(f)蛋白酶解；及

(g)任选实施的化学同位素标记，

条件是：实施根据(a)的化学交联及根据(g)的化学同位素标记的至少之一，其中所述方法不使用伯胺缓冲剂。

6.根据权利要求3的用途或根据权利要求5的方法，其中利用包含或由N,N-二烷基卤代烷酰胺组成的烷基化剂实施根据(e)的所述烷基化，其中

(i)每个烷基独立地选自C₁至C₅非分支或分支的烷基；

(ii)烷烃是非分支或分支的C₂至C₅烷烃；及

(iii)卤素选自氯、溴和碘，

其中每个所述烷基和所述卤代烷酰胺均可以独立地被取代，取代基包括OH。

7.根据权利要求1至3或6之一的用途或根据权利要求4至6之一的方法，其中所述样品制备不包括沉淀，优选为蛋白质沉淀。

8.包括或由以下组分组成的试剂盒：

(a)包含或由N,N-二烷基卤代烷酰胺组成的烷基化剂，其中

(i)每个烷基独立地选自C₁至C₅非分支或分支的烷基；

(ii)烷烃是非分支或分支的C₂至C₅烷烃；及

(iii)卤素选自氯、溴和碘，

其中每个所述烷基和所述卤代烷酰胺均可以独立地被取代，取代基包括OH；

(b)缓冲剂，其是叔胺，所述叔胺优选如在权利要求2中所定义。

9.根据权利要求8的试剂盒用于使蛋白质、多肽或肽发生烷基化及优选此外用于化学同位素标记的用途。

10.各自根据权利要求4、6或8之一的方法、用途或试剂盒，其中在所述试剂中两种出现的烷基是甲基或乙基。