[发明专利]一种小干扰核酸和药物组合物及其用途

说明书

提供一种抑制RRM2基因表达的siRNA，该siRNA的正义链碱基序列如SEQ ID NO：2所示，反义链碱基序列如SEQ ID NO：3所示，其磷酸‑糖骨架还可具有修饰基团；包含所述siRNA的药物组合物，可以抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡，从而抑制肿瘤组织生长。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，具体地，涉及一种siRNA(小干扰核酸)、该siRNA的RNA干扰靶核酸、一种药物组合物以及它们的用途。

背景技术

肿瘤目前主要治疗手段仍然是手术、放疗和化疗。虽然目前的治疗方法较以往提高患者的生存率，但仍存在着盲目性，针对性不强。新的化疗药物的不断问世，耐药性成了一个不可忽视的重要问题。以胰腺癌为例，目前，胰腺癌治疗的首选是手术切除，但仅有15-20％的患者确诊时可行手术治疗，胰腺癌患者5年生存率低于5％。胰腺癌对于放疗和化疗均不甚敏感，多数药物客观有效率低于10％。吉西他滨是目前标准胰腺癌化疗的一线治疗药物，但其对于改善患者生存期和生活质量的疗效有限。在进展期的胰腺癌患者，吉西他滨的客观有效率仅12％左右，生存期仅仅轻度延长。总体上说，目前胰腺癌患者仍缺乏有效的治疗手段。

近年来研究表明，细胞信号传导中相关因子的表达异常，肿瘤细胞DNA的合成和修复及其他相关基因的表达异常与耐药的产生存在密切关系。其中，核糖核苷酸还原酶是生物体内唯一的催化四种核糖核苷酸还原、生成相应的脱氧核糖核苷酸的酶。该酶是DNA合成和修复的关键酶和限速酶，对细胞的增殖和分化起着调控作用。核糖核苷酸还原酶(Ribonucleotide Reductase，RR)由大亚基M1和小亚基M2组成，两者均为二聚体结构，通常称为RRM1和RRM2。RRM1具有与底物及变构效应物结合的部位，且含有直接供给电子的硫基，控制着底物的特异性及酶活性的开关是肿瘤抑制基因，也是吉西他滨(Gemcitabine)的分子靶点。RRM2是一种铁硫蛋白，它通过络氨酸残基的苯环形成特异的自由基而参加催化反应，既是负责底物转化的催化区，又携带接触抑制区。RRM2是一个同源二聚体，形成两个相同的二价铁中心，稳定一个络氨酰自由基，这些对催化过程中触发电子运输非常重要。而且，目前已经发现RRM2在肿瘤中具有高表达；虽然有文献(CN200680018408.5)报道了含有RRM2的siRNA药物组合物可以用于治疗肝癌，但是，其siRNA体内活性不高；同时由于给药载体的自身缺陷，只能瘤内局部给药，2个siRNA组成的cocktail用药量还在2.5mg/kg，且给药频率高，为每日一次，连续给药3次。这种肝内动脉施用法，施用频率高，给药量大，难以满足临床需求。

发明内容

本发明的目的是提供一种针对RRM2基因的高效siRNA序列，并提供包含有该siRNA序列的药物组合物，该药物组合物可以有效抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡，从而抑制肿瘤组织生长。本发明与现有技术相比，提供了全新高效的siRNA及其药物组合物，通过系统给药，降低了给药剂量，并延长了给药间隔，具备临床研究及商业化开发的现实性。

第一方面，本发明提供了一种siRNA，其中，该siRNA的正义链碱基序列如SEQ IDNO：2所示，且该siRNA的反义链碱基序列如SEQ ID NO：3所示；且所述siRNA的磷酸-糖骨架分别具有或不具有修饰基团。

第二方面，本发明还提供了一种RNA干扰靶核酸，其中，该RNA干扰靶核酸如SEQ IDNO：4所示。

第三方面，本发明提供了一种药物组合物，该药物组合物含有如上所述的siRNA和药学上可接受的载体，其中，所述药学上可接受的载体含有有机胺、胆固醇和聚乙二醇化磷脂；其中，所述有机胺为如式(1)所示的化合物和/或它的药学上可接受的盐：