[发明专利]用于治疗肿瘤的方法

说明书

本发明提供通过给予有效量的抑制miR‑27a、或其变体与其靶标mRNA结合的寡核苷酸，用于增加肿瘤对免疫疗法、化学疗法或放射疗法的敏感性的方法。用于本发明的寡核苷酸典型地以blockmir的形式用作辅助疗法来抑制肿瘤生长、正常化和/或改善肿瘤脉管系统的功能、和/或促进肿瘤的免疫细胞浸润。

技术领域

本发明总体上涉及在抑制肿瘤生长中使用寡核苷酸作为辅助疗法，用于正常化和/或改善肿瘤脉管系统的功能、和/或提高肿瘤的免疫细胞浸润的用途。

背景技术

随着肿瘤的生长，其对营养物质的需求变得更大，并且诱导血管生成为肿瘤提供新的脉管系统。此肿瘤脉管系统与正常脉管系统不同，是组织不良的并具有异常的血管壁。更少的紧密连接、内皮细胞之间的空隙、松散附接的周细胞、和异常的基底膜以及细胞外基质导致高渗透型内皮屏障。这种差的血管形成促成肿瘤中的缺氧微环境，其诱导促进肿瘤进一步发展的生物化学途径，例如经由血管内皮生长因子(VEGF)和缺氧诱导因子(HIF)。因此，缺氧促进血管生成、炎症、癌症干细胞形态、免疫抑制和无氧代谢。缺氧环境也可诱发肿瘤转移。

肿瘤的灌注不良的进一步后果是依赖于用于递送的脉管系统的治疗性处理(例如化学疗法和免疫疗法)的损害。已经使用抗血管生成剂取得一些成功，能够暂时正常化肿瘤脉管系统并减轻缺氧(参见例如，Jain，2001 Nat.Med.[自然医学]9，685-693)，并且组合抗血管生成剂与化学治疗剂的辅助疗法已经显示在一些癌症患者增加存活率。然而，抗血管生成剂可以造成对肿瘤血管广泛的损伤(包括破坏)，并且血管正常化不会持续。因此，目前的肿瘤治疗在其有效递送方面造成困难，并且在治疗方案中所需的高剂量治疗剂可能产生不希望的副作用。

因此，需要下述新型治疗：有效靶向肿瘤脉管系统而不引起已知抗血管形成治疗的损伤作用。

发明内容

本文披露的是使用寡核苷酸用于调节肿瘤基质、肿瘤脉管系统、转移和对治疗的敏感性，其中该寡核苷酸包含与显示在SEQ ID NO：1中的序列互补或能够与显示在SEQ IDNO：1中的序列结合的序列。

在本发明的第一方面提供用于增加肿瘤对免疫疗法、化学疗法或放射疗法的敏感性的方法，其中该方法包括向对其有需要的受试者给予有效量的寡核苷酸，该寡核苷酸包含与RNA序列的至少8个连续碱基互补的连续序列，该RNA序列包含：SEQ ID NO：1，或者包含1个、2个或3个取代的SEQ ID NO：1，其中该寡核苷酸抑制miR-27a、其变体、或包含种子区(该种子区包含序列UCACAG)的miRNA与所述RNA的结合。

该方法可以进步一包括在所述受试者中所述肿瘤的免疫疗法、化学疗法或放射疗法。在实施例中，将该寡核苷酸在所述肿瘤的免疫疗法、化学疗法或放射疗法之前、与之伴随、之后、或另外与其组合给予。

在具体的实施例中，该寡核苷酸包含与RNA序列的至少8个连续碱基互补的连续序列，该RNA序列包含：SEQ ID NO：2，或者包含1个、2个或3个取代的SEQ ID NO：2，其中该寡核苷酸抑制miR-27a、其变体、或包含种子区(该种子区包含序列UCACAG)的miRNA与所述RNA的结合。

典型地，该miR-27a miRNA是包含列于SEQ ID NO：9中的核苷酸序列的hsa-miR-27a。

在实施例中，该寡核苷酸包含与SEQ ID NO：2，或者包含1个、2个或3个取代的SEQID NO：2的至少或约7个碱基、至少或约8个碱基、至少或约9个碱基、至少或约10个碱基、至少或约11个碱基、至少或约12个碱基、至少或约13个碱基、至少或约14个碱基、至少或约15个碱基、至少或约16个碱基、至少或约17个碱基、至少或约18个碱基、至少或约19个碱基、至少或约20个碱基、至少或约22个碱基、至少或约25个碱基、至少或约30个碱基、或至少或约35个碱基的序列互补的连续序列。

典型地，该寡核苷酸与SEQ ID NO：2的位置22-27结合。