[发明专利]活重组麻疹-M2病毒-其在诱发针对流感病毒的免疫力中的应用

说明书

本发明涉及一种活性成分，其是表达甲型流感病毒抗原的减毒活重组麻疹病毒，并涉及其在诱发免疫力的应用，特别是针对甲型流感病毒的保护性免疫和有利的广谱保护性免疫。特别地，甲型流感病毒选自流行的季节性病毒和/或在人群中循环的流行病毒，并且有利地包括大流行性病毒例如H1N1v。

本发明涉及针对甲型流感病毒的免疫性领域。在这方面，本发明提供了源自流感病毒的载体化抗原，其引发针对甲型流感病毒的免疫应答。本发明因此涉及一种活性成分，其是表达甲型流感病毒抗原的减毒活重组麻疹病毒，以及涉及其在诱发免疫力中的应用，特别是针对甲型流感病毒的保护性免疫和有利的广谱保护性免疫。

流感是由流感病毒引起的，在季节性流行期间，流感病毒通常会感染世界各地的人，导致大量受感染的人类宿主的严重疾病或死亡。除了季节性流行之外，流感病毒还可能成为可能导致大流行病的新型菌株。

流感病毒分类为甲型流感、乙型流感和丙型流感，甲型流感病毒株被认为是导致季节性疾病和大流行性流感爆发的主要病原体。甲型流感病毒通过参考表面抗原来分类，该表面抗原是已经鉴定了18个亚型的血凝素抗原(HA)和定义了11个亚型的神经氨酸酶抗原(NA)。因此，定义一种病毒株为A/HxNy，其中“x”限定HA的亚型，“Y”限定NA 抗原的亚型。已知这些表面抗原构成免疫应答的靶标。在各种亚型中，A/H1N1和A/H3N2 分别是自1918年和1968年以来在人群中循环的病毒亚型；由此认为它们衍生出适合设计季节性疫苗的抗原，因此它们的HA和NA抗原相应地包含在针对季节性流感的疫苗组合物中。然而，由于HA和NA抗原在宿主免疫系统的选择性压力下在病毒株中不断进化，故利用这些抗原的疫苗必须每年重新设计并更新。HA和NA经历两种类型的抗原进化。第一种类型是抗原漂移，其对应于随着时间累积的点突变并导致抗原性不同的病毒。第二种类型是抗原转变(antigenicshift)，感染人类的甲型流感病毒的突然和主要改变，导致新的血凝素和/或新的血凝素和神经氨酸酶蛋白。转变是由于在人群中引入新的甲型流感病毒亚型或带有血凝素或血凝素/神经氨酸酶组合的病毒所导致的，其与人体中的同一亚型是如此不同以致大多数人对新病毒没有免疫力。这种“转变”发生在2009年，一种新的H1N1病毒株(称为H1N1pdm或H1N1v)出现并迅速传播，引起大流行性疾病并最终替代季节性 H1N1。

因此，仍然有必要提出替代疫苗的候选，其可避免与甲型流感病毒抗原的高度变异相关的缺点，并且，还能够提供针对较广范围的甲型流感病毒株，特别是流行性甲型流感病毒株和大流行性甲型流感病毒株的保护。然而，在制定和公开的策略中遇到了困难，即使这样的策略旨在在不同流感病毒株中靶向保守流感抗原基序，特别是核蛋白(NP)，基质(M1和M2)蛋白质或HA糖蛋白中的保守基序。

基于M2的流感疫苗由于其保守的氨基酸序列，而被提出作为诱发针对流感病毒的免疫应答的有希望的靶标。特别是已经公开了使用蛋白质的胞外域(M2e)的各种候选疫苗。然而，尚未证实使用M2或M2e抗原的各种尝试诱发抗体或T细胞应答，该应答要足够强且持久以有效且广泛地保护人类对抗流感病毒，不论是针对季节性病毒还是大流行性病毒，并且这些结果与在感染期间观察到的该抗原的弱免疫力相关(Deng L.等，2015)。

M2蛋白的M2e胞外域也是各种研究的主题，试图确定其在设计疫苗中的优势(interest)，因为M2e似乎在任何亚型的人类流行性病毒株中均高度保守，并且似乎不参与影响免疫竞争的漂移/转变现象(例如，用HA抗原所观察到的)，从而当定义能够诱发长效应答的广谱甲型流感疫苗时，使得这种M2e抗原成为诱发针对流感病毒感染的保护性应答的有吸引力的抗原。然而，该结构域在感染和常规疫苗接种过程中也仅具有最小的免疫原性，这可能是由于病毒体中M2的丰度低。然而，已经观察到，当用第一病毒感染引发的哺乳动物宿主用包含异源亚型的流感病毒再感染而增强时，B细胞库能够产生特异性抗-M2e抗体应答(Deng L.等，2015)。

因此，发明人已经推定M2抗原，特别是含有M2e结构域的M2抗原部分的优势需要进一步思考以改善其潜力，并可能需要开发适当的载体分子或系统。