[发明专利]用于分析物检测的方法和试剂盒在审
申请号: | 201680049464.9 | 申请日: | 2016-08-18 |
公开(公告)号: | CN108026573A | 公开(公告)日: | 2018-05-11 |
发明(设计)人: | J.K.霍尔顿;P.J.塔特内尔 | 申请(专利权)人: | 通用电气医疗集团英国有限公司 |
主分类号: | C12Q1/686 | 分类号: | C12Q1/686 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 徐晶;黄希贵 |
地址: | 英国白*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 分析 检测 方法 试剂盒 | ||
1. 一种检测一种或多种分析物的方法,其包括在固体载体上存储低分子量单链核酸(10-100 nt);并扩增所述核酸。
2. 根据权利要求1的方法,其中所述低分子量核酸是特异性的ss DNA或ss RNA适配体或适配体库,且所述方法包括在分析物检测之前,使一种或多种分析物与用于分析物检测或适配体选择的所述扩增的适配体结合的步骤。
3.根据权利要求1或2的方法,其中所述固体载体包含:纤维素基纸、编织或非编织纤维材料,包括人造,或天然存在的聚合物纤维、基于矿物纤维的材料例如玻璃纤维材料,或表面处理的固体材料,例如化学或机械处理的材料,包括激光蚀刻的表面,全部提供有主要保持DNA、RNA和蛋白分子的足够粗糙度的表面粗糙度,或凝胶,例如藻酸盐,全部任选用稳定剂或试剂混合物化学处理。
4.根据权利要求3的方法,其中所述试剂或试剂混合物包含:弱碱、抗氧化剂和螯合剂,和任选的阴离子表面活性剂,或包含:离液序列高的物质例如离液序列高的盐。
5.根据上述权利要求的一项或多项的方法,其中所述固体载体,或其部分,例如提供有存储的适配体的穿孔被切除并放入已经提供有或将提供有扩增试剂的反应孔或管中。
6.根据权利要求5的方法,其中所述适配体从所述固体载体提取并作为溶液加入到随后的扩增步骤中。
7.根据权利要求5的方法,其中具有存储的适配体的所述穿孔被放置在反应板的反应孔中,且所述孔提供有扩增试剂,且其中所述存储的适配体在反应孔中扩增。
8.根据权利要求5、6或7的方法,其中所述扩增试剂作为冻干的材料存在于反应孔中。
9.根据权利要求5、6、7或8的方法,其中所述反应板的孔用初次适配体涂布,而自穿孔扩增的适配体在分析物的检测反应中用作二次适配体。
10.根据上述权利要求的一项或多项的方法,其中所述固体载体包含纤维素基纸且适配体的扩增通过RCA、滚环扩增进行。
11.根据上述权利要求的一项或多项的方法,其中所述扩增的适配体提供有报告体分子,例如荧光团、催化的适配体(核糖酶和DNAzymes)。
12.一种试剂盒,其包含存储于固体载体,优选纤维素基纸上的适配体,和提供有包含扩增试剂的反应孔的反应板。
13.根据权利要求12的试剂盒,其中所述反应板的孔用初次适配体涂布。
14. 固体纸载体存储低分子量核酸(10-100 nt),优选特异性适配体或适配体库的用途。
15. 根据权利要求14的用途,其中施加到固体载体的适配体被用来选择i) 对先前筛选适配体具有较高的结合亲和力的特异性适配体或ii) 选择针对特异性分析物的新适配体。
16.根据权利要求14或15的用途,其中所述适配体是RNA适配体和所述固体载体优选地是RSM。
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