[发明专利]用于鉴定IDO1和/或TDO调节剂的筛选测定法

权利要求书

1.用于鉴定吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)和/或色氨酸2,3-双加氧酶(TDO)调节剂的基于细胞的方法，包括：

a.提供重组表达IDO1和/或TDO的细胞，其中所述IDO1和/或TDO表达是可诱导的，

b.使步骤a)的细胞与测试化合物和IDO1和/或TDO底物接触，

c.使步骤b)的混合物与犬尿氨酸感受器接触，和

d.测量步骤c)的混合物的荧光读数，其中在候选化合物存在下与空白相比改变的荧光读数指示IDO1和/或TDO活性的调节剂。

2.权利要求1所述的基于细胞的方法，其中所述细胞是HepG2细胞。

3.权利要求1或2所述的基于细胞的方法，其中可诱导的IDO1和/或TDO表达是由于Tet-on系统。

4.权利要求1至3所述的基于细胞的方法，其中所述犬尿氨酸感受器是7-(二乙基氨基)-4-乙基硫基-2-氧代-色烯-3-甲醛(感受器1)。

5.权利要求4所述的基于细胞的方法，其中所述荧光在激发：520-560nm和发射：580-680nm下测量。

6.权利要求1至5所述的基于细胞的方法，其中未诱导的细胞被用作空白。

7.权利要求1至6所述的基于细胞的方法，其中所述IDO1和/或TDO是人IDO1和人TDO。

8.权利要求1至7的基于细胞的方法，其中重组表达IDO1和/或TDO的细胞是稳定的细胞系。

9.权利要求1至8所述的基于细胞的方法，其中在步骤d)中，测量步骤c)的混合物的上清液的荧光读数。

10.权利要求1至9所述的基于细胞的方法，其中所述方法在costar 384孔板中进行。

11.权利要求1至10所述的基于细胞的方法，其中与空白相比在候选化合物存在下降低的荧光读数指示IDO1和/或TDO抑制剂。

12.权利要求1至10所述的基于细胞的方法，其中与空白相比在候选化合物存在下增加的荧光读数指示IDO1和/或TDO激活剂。

13.权利要求1至12所述的基于细胞的方法，其中所述IDO1和/或TDO底物是色氨酸。

14.权利要求1至13所述的基于细胞的方法，其中所述方法是自动化的。