[发明专利]用于制备L-甲硫氨酸的方法

权利要求书

1.用于制备L-甲硫氨酸的方法，其至少包括以下步骤：

a)制备包含以下物质的混合物：

1)二甲基二硫醚(DMDS)，

2)催化量的带有巯基的氨基酸或含巯基的肽，其中带有巯基的氨基酸或带有巯基的肽选自半胱氨酸，高半胱氨酸，谷胱甘肽和硫氧还蛋白，

3)催化量的用于催化还原反应的酶，所述还原反应是所述携带巯基的氨基酸或所述含巯基的肽的二硫键的还原反应，

4)相对于DMDS的化学计量的有机还原化合物，

5)催化量的用于催化所涉及的有机还原性化合物的脱氢反应的酶，

6)催化量的该催化体系的脱氢酶和还原酶的两种酶的共同辅因子，

b)进行酶促反应以形成甲硫醇(CH₃-SH)，

c)加入L-甲硫氨酸的前体，并使用在步骤b)中形成的甲硫醇转化所述前体，其中所述L-甲硫氨酸的前体选自O-乙酰-L-高丝氨酸和O-琥珀酰-L-高丝氨酸，以及

d)回收并任选纯化形成的L-甲硫氨酸，

其中反应温度在10℃至50℃。

2.根据权利要求1所述的方法，其包括至少以下步骤：

a')制备混合物，所述混合物包含：

•二甲基二硫醚(DMDS)，

·催化量的带有巯基的氨基酸或含巯基的肽，

·催化量的对应于所述带有巯基的氨基酸或所述含巯基的肽的还原酶，

•催化量的NADPH，

b')加入相对于二甲基二硫醚为化学计量的量的有机还原化合物与催化量的相应的脱氢酶，

c')进行酶促反应以形成甲硫醇(CH₃-SH)，

d')使用在步骤c')中形成的甲硫醇转化L-甲硫氨酸前体，和

e')回收并任选纯化形成的L-甲硫氨酸。

3.根据权利要求1或2的方法，其中使甲硫醇直接与甲硫氨酸前体接触。

4.根据权利要求1或2的方法，其中所述有机还原化合物是具有羟基官能团的供氢有机还原化合物，其选自醇。

5.根据权利要求1或2的方法，其中所述有机还原化合物选自葡萄糖，葡萄糖-6-磷酸酯和异丙醇。

6.根据权利要求1或2的方法，其中甲硫醇在离开反应器时被直接用在L-甲硫氨酸的合成中。

7.根据权利要求6所述的方法，其包括至少以下步骤：

步骤1：制备L-甲硫氨酸的前体，

步骤2：在反应器R1中酶促还原DMDS，形成甲硫醇，其离开所述反应器R1，

步骤3：用来自步骤1的前体和来自步骤2的甲硫醇在反应器R2中酶促合成L-甲硫氨酸，

任选的步骤4：将在步骤3中形成的葡糖酸内酯再循环至步骤1中，

步骤5：回收并任选纯化所形成的L-甲硫氨酸。

8.根据权利要求1或2的方法，其中从DMDS合成甲硫醇和从所述甲硫醇合成L-甲硫氨酸在一个并相同的反应器中进行。

9.根据权利要求8所述的方法，其包括至少以下步骤：

步骤1'：通过葡萄糖的细菌发酵制备L-甲硫氨酸的前体，

步骤2'：在反应器R1中酶促还原DMDS，原位形成甲硫醇，并在该相同的反应器中使用在步骤1'中获得的前体伴随酶促合成L-甲硫氨酸，

任选的步骤3'：将在步骤2'中形成的葡糖酸内酯再循环至步骤1'，和

步骤4'：回收并任选纯化形成的L-甲硫氨酸。

10.根据权利要求1或2的方法，其分批或连续进行。

11.根据权利要求1或2的方法，其中理想有机还原化合物/DMDS摩尔比为0.01至100。

12.根据权利要求1或2的方法，其中DMDS/L-甲硫氨酸的前体的摩尔比为0.1-10。