[发明专利]用于HPV诱导的浸润性癌、非HPV诱导的妇科癌症和肛门生殖器癌症及其高级别前期病变的ZIC1和GHSR分子诊断标志物

权利要求书

1.一种用于检测HPV诱导的高级别癌变前病变和HPV诱导的浸润性癌以及非HPV诱导的妇科癌症和肛门生殖器癌症的方法，所述方法包括检测细胞中GHSR和/或ZIC1基因的超甲基化，由此这样的超甲基化指示存在具有浸润潜力的HPV诱导的前期病变、HPV诱导的浸润性癌和非HPV诱导的妇科癌症和肛门生殖器癌症。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述HPV诱导的高级别癌变前病变或HPV诱导的浸润性癌是高级别癌前宫颈病变或浸润性宫颈癌.

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述HPV诱导的浸润性癌是高风险HPV诱导的浸润性癌.

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述非HPV诱导的妇科癌症是子宫内膜癌。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述超甲基化在如图1和图2所示的富含CpG序列中检测。

6.一种根据权利要求1-5中任一项检测HPV诱导的高级别癌变前病变和HPV诱导的浸润性癌以及非HPV诱导的妇科癌症或肛门生殖器癌症的方法，其中所述超甲基化是与可比较的正常细胞相比，测试细胞中GHSR和/或ZIC1的富含CpG启动子和/或基因序列中增加的甲基化。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中试剂是选自由BssHII、MspI、NotI和HpaII组成的组中的甲基化敏感性限制性核酸内切酶。

8.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述方法涉及纳米技术，优选芯片上实验室技术。

9.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中进行甲基化特异性PCR，其基于DNA的亚硫酸氢盐修饰，然后进行靶向富含CpG序列的特异性PCR反应。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述试剂是与如图1或图2所示的核酸结合的核酸探针或引物。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述核酸探针或引物具有可检测的标记。

12.根据权利要求9、10或11所述的方法，其中所述核酸探针具有选自由以下组成的组中的核苷酸序列：

a)能够在严格条件下与图1所示的序列ZIC1或图2所示的序列GHSR杂交的多核苷酸序列；

b)与a)的多核苷酸中的一种具有至少70％同一性的多核苷酸；

c)与a)的多核苷酸中的一种互补的多核苷酸；以及

d)包括a)或b)的多核苷酸中的一种的至少15个碱基的多核苷酸。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的方法，其中确定所述GHSR和ZIC1基因的所述甲基化。

14.GHSR和/或ZIC1作为用于检测HPV诱导的高级别癌变前病变或HPV诱导的浸润性癌或非HPV诱导的妇科癌症或肛门生殖器癌症的分子诊断标志物的用途，优选地其中所述标志物的甲基化预测所述病变、癌或癌症的发生。

15.根据权利要求1-14中任一项所述的方法，其中所述细胞来源于尿样本或宫颈样本。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述宫颈样本是自样本。

17.在检测HPV诱导的高级别癌变前病变或HPV诱导的浸润性癌或非HPV诱导的妇科癌症或肛门生殖器癌症的方法中使用的零件的试剂盒，所述试剂盒包括：

用于检测GHSR和/或ZIC1甲基化的装置，其中所述装置包括对于图1的ZIC1核苷酸序列和/或图2的GHSR核苷酸序列特异性的探针和/或引物；

用于检测HPV感染的装置，其中所述装置包括对于HPV特异性的探针和引物。